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CY5.5-D-Glutamic Acid,CY5.5标记D-谷氨酸的制备方法

时间:2025-08-06 11:29:23       浏览:8
CY5.5-D-Glutamic Acid,CY5.5标记D-谷氨酸的制备方法
CY5.5-D-Glutamic Acid 是通过将近红外荧光染料CY5.5与D-谷氨酸(D-Glutamic acid)共价连接而成的分子探针。D-谷氨酸作为非对称氨基酸之一,具有独特的立体构型和生物学功能。其标记物广泛用于生物分子标记及成像研究。
制备方法步骤概述
原料准备
购置高纯度D-谷氨酸,确保无杂质。
选择带有活性羧基的CY5.5衍生物,通常为CY5.5-NHS酯,便于与氨基发生酰胺键反应。
溶液配置
将D-谷氨酸溶解于适当缓冲液中(pH约为8.0-8.5,常用碳酸氢钠缓冲液),保证氨基活性。
CY5.5-NHS酯溶解于无水有机溶剂(如DMSO),防止水解。
共价偶联反应
缓慢将CY5.5-NHS溶液滴加至D-谷氨酸溶液中,温和搅拌反应。
反应时间通常为4-12小时,室温条件下进行,避免光照以保护染料。
反应机制
D-谷氨酸上的α-氨基作为亲核试剂,攻击CY5.5-NHS酯中的活性酯碳,形成稳定的酰胺键,释放N-羟基琥珀酰亚胺。
纯化过程
反应完成后,通过透析(分子量截断约1 kDa)或高效液相色谱(HPLC)去除游离染料和杂质。
透析水或缓冲液多次更换,确保纯度。
干燥与保存
纯化后的产物进行冻干处理,得到稳定的CY5.5-D-谷氨酸粉末。
储存在避光、干燥、低温条件下。
表征
采用紫外-可见吸收光谱和荧光光谱确认标记成功。
质谱和核磁共振(NMR)分析验证结构完整性。
pH稳定性和光稳定性测试确保应用稳定。
产品名称:CY5.5-D-Glutamic Acid,CY5.5标记D-谷氨酸
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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