产品分类
快速订购
31952518
- 029-86354885
- 18392009562
sales@xarxbio.com
首页 > 资料专栏
产品名称:Cy5-NH2,花菁染料Cy5-氨基的操作要点
操作要点:高效标记与稳定性的关键
标记前准备
目标分子活化:若标记羧基(-COOH),需用EDC/NHS活化生成NHS酯,提高反应效率。
pH控制:氨基反应通常在弱碱性条件(pH 7.5-8.5)下进行,避免氨基质子化(pKa≈9-10)降低反应活性。
溶剂选择:优先使用DMSO、DMF或PBS缓冲液,避免高极性溶剂(如水)降低反应速率。
标记反应条件
摩尔比:Cy5-NH₂与目标分子的摩尔比通常为1:1-1:5(过量染料可提高标记效率,但需后续纯化)。
反应时间:室温孵育1-4小时,或4℃过夜(低温减少副反应)。
避光操作:Cy5对光敏感,需在暗处或黄光下操作。
纯化与验证
纯化方法:
透析:MWCO 3500-10000 Da,去除未反应的Cy5-NH₂(小分子染料)。
凝胶柱层析(如Sephadex G-25):分离标记产物与游离染料。
HPLC:反相C18柱纯化,验证标记纯度(>95%)。
验证方法:
荧光光谱:检测标记产物的吸收/发射波长是否与Cy5一致。
SDS-PAGE:若标记蛋白质,通过凝胶电泳验证分子量变化。
质谱:测定标记产物的分子量,确认标记位点(如单标记或双标记)。
稳定性测试
光稳定性:标记产物在连续光照(如氙灯)下照射1小时,荧光强度衰减<10%为合格。
化学稳定性:在PBS或血清中孵育24-48小时,荧光强度保持>90%为稳定。
存储条件:标记产物需避光、干燥保存(-20℃),避免反复冻融。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
我们可以提供的相关产品)
CY3-MAL 花菁染料CY3-马来酰亚胺
CY3-HZ,花菁染料CY3-酰肼
CY7.5-NHS ester 花菁染料CY7.5-活性酯
Sulfo CY5-COOH 磺化CY5 羧基
Sulfo CY7-MAL 水溶性花菁染料-马来酰亚胺
Sulfo-CY3-MAL 磺化CY3-马来酰亚胺
Sulfo-CY5-MAL 磺化CY5-马来酰亚胺
操作要点:高效标记与稳定性的关键
标记前准备
目标分子活化:若标记羧基(-COOH),需用EDC/NHS活化生成NHS酯,提高反应效率。
pH控制:氨基反应通常在弱碱性条件(pH 7.5-8.5)下进行,避免氨基质子化(pKa≈9-10)降低反应活性。
溶剂选择:优先使用DMSO、DMF或PBS缓冲液,避免高极性溶剂(如水)降低反应速率。
标记反应条件
摩尔比:Cy5-NH₂与目标分子的摩尔比通常为1:1-1:5(过量染料可提高标记效率,但需后续纯化)。
反应时间:室温孵育1-4小时,或4℃过夜(低温减少副反应)。
避光操作:Cy5对光敏感,需在暗处或黄光下操作。
纯化与验证
纯化方法:
透析:MWCO 3500-10000 Da,去除未反应的Cy5-NH₂(小分子染料)。
凝胶柱层析(如Sephadex G-25):分离标记产物与游离染料。
HPLC:反相C18柱纯化,验证标记纯度(>95%)。
验证方法:
荧光光谱:检测标记产物的吸收/发射波长是否与Cy5一致。
SDS-PAGE:若标记蛋白质,通过凝胶电泳验证分子量变化。
质谱:测定标记产物的分子量,确认标记位点(如单标记或双标记)。
稳定性测试
光稳定性:标记产物在连续光照(如氙灯)下照射1小时,荧光强度衰减<10%为合格。
化学稳定性:在PBS或血清中孵育24-48小时,荧光强度保持>90%为稳定。
存储条件:标记产物需避光、干燥保存(-20℃),避免反复冻融。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
我们可以提供的相关产品)
CY3-MAL 花菁染料CY3-马来酰亚胺
CY3-HZ,花菁染料CY3-酰肼
CY7.5-NHS ester 花菁染料CY7.5-活性酯
Sulfo CY5-COOH 磺化CY5 羧基
Sulfo CY7-MAL 水溶性花菁染料-马来酰亚胺
Sulfo-CY3-MAL 磺化CY3-马来酰亚胺
Sulfo-CY5-MAL 磺化CY5-马来酰亚胺
序号 | 新闻标题 | 浏览次数 | 作者 | 发布时间 |
---|---|---|---|---|
1 | 瑞禧-分子量可选的DPPE-mPEG单边活性peg衍生物简介 | 274 | 瑞禧生物 | 2023-02-09 |
2 | TCO-PEG-PAE,反式环辛烯-聚乙二醇-聚酰胺环氧氯丙烷树脂 | 310 | 瑞禧生物 | 2023-07-14 |
3 | Biotin-PEG-Biotin(MW 3400),双生物素-聚乙二醇 | 369 | 瑞禧生物 | 2024-06-24 |
4 | 1404201-64-4,铝基金属骨架MIL101-NH2-AL | 709 | 瑞禧生物 | 2023-02-21 |
5 | Alexa Fluor 488标记牛血清白蛋白,Alexa Fluor 488-BSA-瑞禧分享 | 703 | 瑞禧生物 | 2023-09-05 |
6 | Cyclen-PEG-DSPE,轮环藤宁-聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 | 645 | 瑞禧生物 | 2023-07-31 |
7 | (4E)-TCO-C3-PEG3-C3-amine,(4E)-反式环辛烯-C3-三聚乙二醇-C3-氨基 | 574 | 瑞禧生物 | 2023-07-14 |