1. RGD 修饰的线粒体靶向长循环脂质体(RLP-TPP-1脂质体)：

用前药三苯基膦(TPP)-白藜芦醇(1)为模型药，采用薄膜分散法制备RGD 修饰的线粒体靶向长循环脂质体(RLP-TPP-1脂质体)。

（1） 将TPP连接药物1构成前药TPP-1，利用TPP的线粒体趋向作用携载药物进入线粒体，以增加1在作用位点的蓄积。

（2） 由于TPP-1的水溶性仍然较差，生物利用度低，采用脂质体作为载体包载TPP-1，并在脂质体表面修饰聚乙二醇(PEG)和细胞靶向肽RGD(精氨酸-甘氨酸-门冬氨酸)。

2. 作用：

一方面，脂质体可将疏水性药物包载于脂质双分子层中以改善其水溶性，PEG修饰增加长循环作用；

另一方面，RGD肽通过主动识别人源三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231表面过表达的ανβ3整合素受体，增加细胞对脂质体的摄取，从而进一步增加肿瘤细胞线粒体中的药物浓度。

3. 脂质体的制备：

（1） 合成DSPE-PEG2000-Mal。按摩尔比1.5∶1称取DSPE和NHS-PEG2000-Mal，溶于无水氯仿中，滴加适量三乙胺，氮气保护下，在40℃油浴中搅拌反应5 h，薄层色谱法(TLC)监测反应进程。反应结束后旋转蒸除大部分氯仿，将浓缩后的反应体系加至冷乙腈中沉淀未反应的DSPE，离心(2414×g)10 min。取上清液，旋蒸除去有机溶剂，残留物用双蒸水4ml溶解，置透析袋(Mw8000～14000)中，用蒸馏水透析48h，除去未反应的NHS-PEG2000-Mal。透析结束后冻干，得产物DSPE-PEG2000-Mal，产率约76.3％。用DSPE和mPEG2000-NHS按相同方法合成DSPE-PEG2000。

（2） 合成DSPE-PEG2000-RGD。取适量上述所得的DSPE-PEG2000-Mal溶于少量氯仿中，减压除去有机溶剂形成薄膜，用0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS, pH7.4)水化，水浴超声2 min，加入1.5 倍当量cRGDyk-cys，4℃反应48 h，产物置透析袋中，用蒸馏水透析2d除去过量的cRGDyk-cys，透析结束后冻干，即得产物DSPE-PEG2000-RGD，并用1H NMR 和FTIR对其进行结构表征。

4. 试验结果：

线粒体靶向基团TPP的引入显著增加了药物在线粒体内的蓄积，增强治疗效果。同时细胞试验也表明在脂质体表面修饰肿瘤细胞靶向肽RGD能进一步增加细胞对药物的摄取量。

关键词（均可定制，PEG分子量可选）：

脂质体表面修饰聚乙二醇(PEG)

细胞靶向肽RGD(精氨酸-甘氨酸-门冬氨酸)

DSPE-PEG2000-Mal

DSPE-PEG2000

NHS-PEG-Mal

DSPE-PEG2000-RGD

DSPE-PEG-RGD

DSPE-PEG2000-cRGD,多肽序列:c(RGDyk)

脂质体表面修饰肿瘤细胞靶向肽RGD

DSPE-PEG(2000)-square

DOPE-PEG-CY5

DOPE-PEG-CY7.5

DOPE-PEG-CY5.5

DSPE-PEG(2000)-TMS

Bis-DSPE-PEG2000

DSPE-PEG2000-TK-NHS

DSPE-PEG2000-GE11