CY7.5-Cytochrome-C，CY7.5标记细胞色素C的合成步骤概述

CY7.5-Cytochrome-C 是通过将细胞色素 C（Cytochrome C，一种含血基质铁的蛋白质）与近红外荧光染料 CY7.5 偶联形成的标记蛋白。该标记分子在化学研究、蛋白质动力学分析及药物递送研究中具有重要作用。

合成步骤概述：
蛋白质预处理
将 Cytochrome-C 溶解于适宜的缓冲液（如 PBS pH 7.2–7.4）中，保证蛋白质稳定性。
若蛋白质含有自由巯基，可选择保护或活化处理，避免副反应。
CY7.5 荧光团活化
CY7.5 常以 NHS 酯、Maleimide 或其他活化形式存在，能够与蛋白质的氨基或巯基发生共价反应。
活化染料需在暗处溶解，并控制溶剂与浓度，保证反应效率。
偶联反应
将 CY7.5 活化染料缓慢加入 Cytochrome-C 溶液中，温和搅拌反应数小时。
pH 维持在 7–8，避免蛋白质变性，同时保证酰胺键或硫醚键形成。
反应时间与染料/蛋白质摩尔比决定偶联程度，可调控荧光强度与蛋白活性保留。
反应终止与稳定化
反应结束后，可加入适量羟胺或其他试剂封闭未反应的活性酯，避免蛋白质交联。
维持低温和缓冲体系稳定 CY7.5-Cytochrome-C。
纯化步骤
通过透析或凝胶过滤去除未反应染料。
可使用离子交换或尺寸排阻 HPLC 进一步提高纯度。
确保标记蛋白质结构完整、无聚集。
表征与验证
荧光光谱确认 CY7.5 偶联成功。
紫外-可见光谱和质谱分析蛋白质与染料的偶联效率。
功能实验验证 Cytochrome-C 活性及红氧化还原能力保留。
产品名称：CY7.5-Cytochrome-C，CY7.5标记细胞色素C
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc