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CY7.5-Fibrinogen,CY7.5标记纤维蛋白原的合成过程特点
CY7.5-Fibrinogen 是通过将血浆中重要的高分子蛋白纤维蛋白原(Fibrinogen)与近红外荧光染料 CY7.5 共价偶联形成的功能化分子。纤维蛋白原为三链结构的糖蛋白,含丰富的赖氨酸残基和羧基侧链,提供了多种化学修饰位点。CY7.5 偶联不仅赋予其荧光信号,还为蛋白质在体内追踪、药物递送及材料表面功能化研究提供实验平台。
合成过程特点与研究:蛋白质准备与活性保护
将 Fibrinogen 溶解于缓冲液中(如 PBS,pH 7.4)并维持低温,以防止蛋白质聚集或变性。
可添加稳定剂(如糖类或蛋白质保护剂)保护三维结构,确保后续偶联过程中活性保持。
荧光染料活化与偶联反应
CY7.5 通常以 NHS 酯或 Maleimide 活化形式存在,能够与 Fibrinogen 的赖氨酸氨基或半胱氨酸巯基反应。
偶联反应在弱碱性条件(pH 7–8)下进行,温和搅拌若干小时,确保高效偶联同时避免蛋白质交联和聚集。
偶联程度调控
通过调节 CY7.5 与 Fibrinogen 的摩尔比、反应时间及温度,可控制标记密度。
适度标记保持蛋白质的三链结构完整性和生物学功能,避免荧光团过度修饰影响蛋白活性。
纯化过程
采用透析或凝胶过滤去除未反应的 CY7.5 和低分子杂质。
对于要求高纯度的实验,可结合离子交换或尺寸排阻 HPLC 进行精密分离。
过程研究与优化
通过荧光光谱监测偶联效率,紫外-可见吸收光谱分析蛋白质结构稳定性。
动态光散射(DLS)用于检测蛋白质聚集状态,确保偶联产物均一性。
优化缓冲体系、温度及染料浓度,实现高标记效率与功能保留的平衡。
产品名称:CY7.5-Fibrinogen,CY7.5标记纤维蛋白原
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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