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CY7-Uroplakin,CY7标记尿路上皮蛋白的合成过程研究特点

时间:2025-09-03 11:39:38       浏览:86

CY7-Uroplakin,CY7标记尿路上皮蛋白的合成过程研究特点

CY7-Uroplakin是通过将近红外荧光染料Cyanine7(CY7)与尿路上皮蛋白(Uroplakin)偶联形成的标记蛋白。尿路上皮蛋白是一类高度糖基化的膜蛋白,具有特异性胞膜定位能力,用于生物分子研究和膜蛋白功能分析。CY7标记赋予其近红外荧光特性,使其在蛋白追踪、膜结合研究和分子相互作用分析中得到应用。

合成过程研究特点:
蛋白制备与处理
Uroplakin通过重组表达系统获得,经缓冲液纯化和透析去除杂质。
蛋白溶液保持适宜浓度(一般1–5 mg/mL)和pH(7.0–8.0),以保证偶联位点暴露且蛋白结构稳定。
染料活化与溶解
CY7通常以NHS酯或异氰酸酯形式活化,溶解于DMSO或缓冲液中,浓度控制在合理范围,避免光漂白和自聚集。
活化染料确保高亲核反应活性,与蛋白残基有效结合。
偶联反应过程
将活化的CY7与Uroplakin混合,摩尔比一般控制在3–8:1,以实现适度标记而不影响蛋白结构。
反应在室温或低温下进行数小时至过夜,以保证均匀偶联。
缓冲液成分(离子强度、pH)对偶联效率和蛋白稳定性有重要影响。
纯化与过程监控
通过凝胶过滤、透析或超滤去除未反应染料。
采用UV-Vis光谱和荧光光谱监控染料偶联情况,确认标记成功。
SDS-PAGE和色谱分析可用于评估蛋白完整性和偶联均一性。
产品名称:CY7-Uroplakin,CY7标记尿路上皮蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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