Cy3-MUC1，花菁染料CY3标记黏蛋白1
Cy3-MUC1是将花菁染料Cy3共价标记至黏蛋白1（MUC1）形成的荧光标记糖蛋白，用于相关生物标志物研究、细胞膜成像及糖蛋白功能分析。MUC1是一类高分子量跨膜糖蛋白，含有高度O-糖基化的VNTR（可变数目串联重复）区段以及富含丝氨酸和苏氨酸的外胞结构域，这些区域提供了标记位点，同时保持蛋白结构的稳定性。Cy3染料具有高吸光性、优良光稳定性及红橙色荧光（吸收峰约550 nm，发射峰约570 nm），与MUC1结合后可实现荧光示踪与定量分析。
合成步骤概述
蛋白溶液准备
首先，将纯化MUC1溶解于缓冲液中（如PBS，pH 7.4），浓度控制在1–5 mg/mL。若蛋白存在还原剂（如DTT），需提前去除，以避免巯基干扰Cy3偶联反应。
活化染料准备
选择活性Cy3衍生物（通常为Cy3-NHS酯或Cy3-Sulfo-NHS），在干燥的有机溶剂（如DMSO或DMF）中溶解，确保无水环境以避免水解降低活性。染料浓度一般为蛋白摩尔浓度的5–10倍，以提高偶联效率。
偶联反应
将溶解的Cy3染料缓慢加入蛋白溶液中，同时保持轻微搅拌，反应温度控制在室温或4℃。反应pH通常在7.2–8.0范围内，以保证蛋白的稳定性和NHS酯的活性。反应时间1–3小时，可根据需要调整染料与蛋白的摩尔比，以控制标记密度和荧光强度。
终止反应与去除游离染料
反应完成后，可通过加入甘氨酸或Tris缓冲液终止多余的活性酯反应。随后采用透析、超滤或凝胶过滤（如Sephadex G-25/G-50）去除未结合的Cy3染料，获得高纯度Cy3-MUC1产物。
产物浓缩与储存
纯化后的Cy3-MUC1可通过超滤浓缩至所需浓度。为了保持荧光稳定性和蛋白活性，产物应避光、低温（4℃或-20℃）储存，并可添加甘油或BSA作为保护剂。
质量验证
通过UV-Vis光谱测定Cy3吸收峰（≈550 nm）和蛋白吸收峰（≈280 nm）可初步评估标记效率。SDS-PAGE结合荧光成像进一步确认标记均一性，确保蛋白未发生降解或聚集。
总结
Cy3-MUC1的合成通过Cy3-NHS酯与MUC1蛋白表面可用胺基共价偶联实现，步骤包括蛋白溶液准备、染料活化、温和偶联、去除游离染料及产物储存。整个过程温和、可控，保持MUC1结构完整性，同时获得稳定荧光标记产物，适用于细胞膜成像、肿瘤标志物研究及糖蛋白功能分析。
产品名称：Cy3-MUC1，花菁染料CY3标记黏蛋白1
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc