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CY3-HA,花菁染料CY3标记透明质酸

时间:2025-09-17 11:49:30       浏览:61
CY3-HA,花菁染料CY3标记透明质酸
Cy3-HA是通过将红橙色花菁染料Cy3共价标记至透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)形成的荧光衍生物。HA是一种高分子量的多糖,由重复的D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-葡萄糖胺单元组成,存在于真皮、关节液及细胞外基质中。通过Cy3标记,HA不仅保留其的生物功能(如细胞黏附、组织润滑及信号调控),还可获得强荧光信号,实现细胞追踪、成像及药物递送体系构建。
结构合成过程
官能化HA
HA分子含有羧基(–COOH)和少量羟基(–OH),可作为偶联反应位点。为实现Cy3标记,通常先将HA羧基通过EDC/NHS化学活化形成活性酯。EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)作用于HA羧基生成O-酰基异脲中间体,再与NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)反应生成HA-NHS活化酯。此步骤在pH 6.5–7.5缓冲液中进行,温和条件保证HA结构不受降解。
Cy3偶联
活化后的HA-NHS与Cy3含氨基的衍生物(如Cy3-NH2)反应,形成稳定的酰胺键。该反应遵循亲核取代机理,氨基攻击HA-NHS酯碳原子,释放NHS并生成共价连接的Cy3-HA。反应通常在低温(4–25℃)下进行,持续数小时至过夜,以确保充分偶联,同时保护HA链完整性。
反应优化
偶联反应可通过调整Cy3与HA摩尔比、反应时间及缓冲体系优化标记密度。低标记密度可保持HA的生物活性,高标记密度增强荧光信号。反应过程中需避光,以防Cy3光降解。
纯化与稳定性
反应完成后,通过透析或凝胶过滤去除未反应的游离Cy3和小分子杂质,获得高纯度Cy3-HA。纯化后的产物在缓冲液中稳定,低温避光储存可保持荧光强度数周至数月。
结构表征
Cy3-HA的结构可通过UV-Vis吸收光谱(Cy3吸收峰≈550 nm)、荧光光谱(发射峰≈570 nm)、质谱及核磁共振(NMR)验证。通过这些表征手段,可确认Cy3已成功共价连接至HA分子,同时保证HA链结构和分子量完整。
应用价值
Cy3-HA可用于细胞摄取研究、组织分布追踪、药物递送体系构建及组织工程研究。其荧光信号便于定量分析和高分辨率成像,同时保持HA的生物相容性和功能,为生物医学研究提供可靠工具。
产品名称:CY3-HA,花菁染料CY3标记透明质酸
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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