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CY3-Wheat germ agglutinin,花菁染料CY3标记小麦胚芽凝集素

时间:2025-09-17 11:56:23       浏览:95
CY3-Wheat germ agglutinin,花菁染料CY3标记小麦胚芽凝集素
Cy3-Wheat Germ Agglutinin(Cy3-WGA)是通过将红橙色花菁染料Cy3共价标记至小麦胚芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)形成的荧光衍生物。WGA是一种来源于小麦胚芽的植物凝集素,具有特异性的N-乙酰葡糖胺和唾液酸结合能力,可选择性识别细胞表面的糖基化结构。因此,Cy3标记后不仅保留了WGA的生物识别功能,还能通过荧光信号实现细胞膜或糖基化分子的可视化追踪。
反应机制
标记原理
Cy3-WGA的制备通常采用Cy3-NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester)与WGA蛋白表面的赖氨酸残基氨基反应。NHS酯与氨基形成稳定的酰胺键,在中性至微碱性缓冲液(pH 7.2–8.0)条件下进行。该反应温和、效率高,同时不破坏WGA的糖结合活性。通过调控Cy3与WGA的摩尔比,可控制标记密度,保证荧光强度与蛋白活性平衡。
反应步骤
反应通常包括:
WGA溶解于适当缓冲液中(如PBS),保持蛋白结构稳定;
Cy3-NHS酯溶于有机溶剂(如DMSO)并缓慢加入WGA溶液,避免局部高浓度造成蛋白变性;
反应在室温下轻柔搅拌1–2小时,形成Cy3-WGA共价偶联;
通过透析或凝胶过滤去除未反应的Cy3-NHS酯,获得纯净的Cy3-WGA。
化学特性与稳定性
Cy3通过酰胺键与蛋白质连接,键合稳定,在中性pH及低温条件下荧光和蛋白活性保持良好。标记后的WGA仍能与目标糖基结合,不影响其聚合状态和生物功能。荧光吸收峰约550 nm,发射峰约570 nm,可在显微成像和流式分析中实现高灵敏度检测。
结构与功能关系
Cy3-WGA的荧光分布均匀,不影响蛋白的空间构型和糖识别位点。通过合理的标记密度控制,可保证WGA与目标糖基结合能力,同时赋予强烈、稳定的荧光信号。该结构特性使其适合用于细胞膜标记、糖基化研究和纳米载体表面功能化分析。
应用优势
Cy3-WGA应用于细胞膜糖类标记、神经元可视化、组织学染色及生物大分子追踪。其反应机制温和、高效且可控,保证荧光信号稳定的同时保留蛋白识别活性,是细胞生物学和生物材料研究中的重要工具。
产品名称:CY3-Wheat germ agglutinin,花菁染料CY3标记小麦胚芽凝集素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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