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Biotin NH2,111790-37-5,生物素氨基的化学结构与特性

时间:2025-09-17 15:37:57       浏览:70

常用名 生物素-乙二胺

英文名 Biotin-EDA

CAS号 111790-37-5

分子量 354.425

密度 1.4±0.1 g/cm3

沸点 844.9±65.0 °C at 760 mmHg

分子式 C12H22N4O2S

熔点 172-174ºC

闪点 464.8±34.3 °C

Biotin NH2(生物素氨基)是生物素(vitamin H或B7)的一种衍生物,其中生物素分子上的一个羧基被氨基(-NH2)基团所取代。

化学结构与特性

Biotin NH2 的结构合成方法

Biotin NH2的合成通常基于生物素的改造,其中一个羧基被氨基基团取代。常见的合成方法包括:

氨基化反应:通过化学氨基化反应,生物素分子中的羧基被氨基基团(如氨气或氨基化试剂)替代。常用的氨基化试剂包括氨气(NH₃)或氨基化试剂,如氨基甲酸酯类试剂。

酯化反应:将生物素与含有氨基基团的化学试剂反应,形成酰胺化合物,通过控制反应条件确保氨基基团与生物素的结合。

纯化与表征:合成后的Biotin NH2通常需要通过色谱法(如反相高效液相色谱HPLC)进行纯化,并使用核磁共振(NMR)或质谱(MS)进行结构表征,确保产物的纯度和结构的准确性。

4. 应用

Biotin NH2由于其氨基基团的引入,使其在分子生物学、化学合成及生物医学研究中具有重要应用,特别是在标记、交联和探针设计中。主要应用包括:

4.1 分子标记与探针设计

Biotin NH2常用于分子标记和探针设计,尤其是在与亲和素或链霉亲和素标记的实验中。由于生物素与亲和素具有非常强的特异性结合力,Biotin NH2可以作为标记分子与其他化合物(如蛋白质、抗体、核酸探针等)结合,从而进行分子检测、定位和追踪。

抗体标记:Biotin NH2可以与抗体或抗原上的化学位点进行共价结合,生成生物素标记的抗体,用于免疫组化、流式细胞术等分析。

核酸标记:Biotin NH2能够与核酸(如DNA、RNA)结合,形成生物素标记的核酸探针,广泛应用于基因表达分析、杂交实验等。

4.2 蛋白质-蛋白质相互作用研究

Biotin NH2常用于研究蛋白质之间的相互作用。在这种应用中,Biotin NH2被用于标记特定的蛋白质或分子,并通过亲和素拉下(streptavidin pull-down)方法捕获相互作用蛋白质。这在免疫沉淀、共沉淀实验和蛋白质组学中都有应用。

4.3 点击化学

Biotin NH2可以用于点击化学(Click Chemistry)反应。与带有炔基(Alkyne)基团的化合物结合,形成稳定的共价结合,这一反应不仅快速且高效,而且可以选择性地标记特定的分子。Biotin NH2常用于与含炔基的分子进行点击反应,从而进行生物标记、药物修饰等应用。

4.4 免疫分析

Biotin NH2也广泛应用于免疫分析中。其能够与生物素-亲和素体系结合,用于ELISA、Western blot等免疫学检测。这些技术能够有效地检测和定量目标蛋白或其他生物分子。基于标准的生物素分子,其中生物素的二氢噻唑环和吡咯啉环结构得以保留,这些部分参与与亲和素的结合。不同于自然状态的生物素,Biotin NH2 分子上引入了一个氨基(-NH2)基团,替代了生物素分子中的羧基。此氨基基团使Biotin NH2能够与各种活性酯、异硫氰酸酯等化学试剂进行反应,进而与其他分子(如蛋白质、抗体、核酸等)进行共价结合。

生物素基团:保留了与亲和素结合的高特异性,使得Biotin NH2在生物标记和分子检测中广泛应用。

氨基基团:为化学反应提供了反应位点,可以与各种官能团反应,尤其适用于共价连接、交联、标记等反应。

亲和素结合:由于保留了生物素的结构,Biotin NH2能高效地与亲和素结合,具有很强的结合力,广泛应用于生物学和生物化学研究中。

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