Cyanine5-SPA，花菁染料CY5标记葡萄球菌A蛋白的化学结构特点
葡萄球菌A蛋白（Staphylococcal Protein A, SPA）是一种由葡萄球菌产生的球状蛋白，具有高度特异性结合免疫球蛋白Fc段的能力，用于免疫分析、亲和分离和生物标记。通过与花菁染料Cy5偶联形成Cyanine5-SPA，可将SPA的免疫结合特性与荧光检测功能整合，为生物分析和分子成像提供工具。
化学结构特点：
偶联位点选择：
SPA分子中富含赖氨酸残基及少量半胱氨酸残基，提供氨基和巯基的化学反应位点。
Cy5常以NHS酯（Cy5-NHS）或Maleimide形式参与偶联，分别与氨基和巯基形成稳定酰胺键或硫代酰胺键。
这种共价修饰方式保证了Cy5标记的稳定性，同时尽量避免干扰SPA的Fc结合位点。
分子结构保持：
偶联反应在温和条件（pH 7–8, 4–25 °C）下进行，避免蛋白二级结构变性。
Cy5分子通过柔性链与SPA连接，使蛋白整体构象保持球状结构，并保留Fc结合活性。
偶联机制：
Cy5-NHS活性酯碳被SPA赖氨酸氨基亲核攻击，形成稳定酰胺键。
Cy5-Maleimide与自由巯基反应生成稳定的硫代酰胺键，增强标记稳定性。
该共价结合方式可承受生物实验条件，不易水解。
化学结构特点分析：
Cy5-SPA分子可看作蛋白核心结合荧光共轭体系，荧光分子通过柔性链位于蛋白表面。
荧光共轭体系与蛋白表面空间分离，减少对蛋白结合功能的干扰。
分子中酰胺键或硫代酰胺键的形成保证标记长期稳定性及可重复使用性。
表征与验证：
UV-Vis光谱检测Cy5吸收峰，同时保留蛋白特征吸收峰。
荧光光谱评估发射强度，验证荧光特性。
SDS-PAGE结合荧光扫描确认标记分布均匀，质谱或色谱分析进一步验证分子量增加和偶联程度。
应用价值：
Cy5-SPA可用于免疫分离、抗体检测及荧光标记实验。
荧光信号稳定，适用于流式细胞、荧光成像及免疫亲和分析，实现蛋白功能与检测功能的整合。
产品名称：Cyanine5-SPA，花菁染料CY5标记葡萄球菌A蛋白
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc