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Sulfo-Cy3-Streptavidin,磺酸基CY3标记的链霉亲和素的结构合成概述

时间:2025-09-25 13:37:58       浏览:97
Sulfo-Cy3-Streptavidin,磺酸基CY3标记的链霉亲和素的结构合成概述
Sulfo-Cy3-Streptavidin是一种将水溶性荧光染料CY3通过磺酸基修饰与链霉亲和素(Streptavidin, SA)偶联形成的功能性生物分子。SA蛋白具有高度的Biotin亲和力,用于免疫检测、纳米载体标记及分子成像。通过CY3标记,Sulfo-Cy3-Streptavidin可实现生物分子的可视化追踪和定量分析,磺酸基增强水溶性和分子稳定性,使其在体外实验和体内成像中表现优异。
化学结构特点:
CY3荧光核心:CY3是一种花菁素类染料,提供激发光约550 nm、发射光约570 nm的可见光荧光信号,量子产率高、光漂白低,适合细胞及组织成像。
磺酸基修饰:在CY3染料分子上引入磺酸基(–SO₃⁻)提高水溶性,防止染料自聚集,减少在蛋白偶联和体内实验中的非特异性吸附。
链霉亲和素(SA):为四聚体蛋白,每个亚基含多个赖氨酸侧链和N端氨基,可作为CY3-NHS偶联位点,同时保留对Biotin的高度亲和力。
结构合成概述:
CY3活化:将CY3羧基通过水溶性NHS酯活化,生成亲电Sulfo-Cy3-NHS。NHS酯易与蛋白质游离氨基反应形成稳定的酰胺键。
蛋白偶联:SA蛋白在缓冲液中(通常pH 7.4–8.5)与Sulfo-Cy3-NHS反应。CY3通过酰胺键共价偶联到SA的赖氨酸侧链或N端氨基上。
反应条件控制:
pH适中,维持蛋白质构象稳定并保证氨基亲核性;
摩尔比调整控制染料标记密度,既保证荧光信号又保持SA对Biotin结合活性;
温度一般室温或低温,避免蛋白变性。
纯化与表征:通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应染料,使用UV-Vis光谱、荧光光谱及质谱验证标记分子特性,确保荧光活性和Biotin结合功能完整。
应用与优势:
高水溶性和生物相容性,适用于体外和体内实验;
可用于Biotin化蛋白、核酸或纳米载体的荧光标记和追踪;
CY3荧光特性可用于免疫检测、原位杂交、纳米载体分布分析及细胞成像。
产品名称:Sulfo-Cy3-Streptavidin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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