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Sulfo-Cy3.5-Streptavidin,水溶性花菁染料CY3.5标记链霉亲和素的化学结构特点

时间:2025-09-26 11:24:39       浏览:73
Sulfo-Cy3.5-Streptavidin,水溶性花菁染料CY3.5标记链霉亲和素的化学结构特点
Sulfo-Cy3.5-Streptavidin是一种将水溶性花菁染料CY3.5通过化学偶联标记在链霉亲和素(Streptavidin)上的荧光探针。链霉亲和素是一种高度特异性结合生物素(Biotin)的蛋白质,结合常数高(Kd ~10^-15 M),在生物分子标记、分子捕获和药物递送体系中广泛应用。通过Sulfo-CY3.5的水溶性磺酸盐修饰,使偶联分子在水相环境中具有优异溶解性和稳定荧光,为高灵敏度检测和成像提供理想工具。
化学结构特点
CY3.5核心提供红光荧光,吸收峰约550–560 nm,发射峰约570–580 nm。
水溶性Sulfo修饰保证蛋白质偶联后的分子在缓冲液中高效溶解,降低非特异性吸附。
偶联方式通常采用NHS酯或异硫氰酸酯与链霉亲和素赖氨酸残基氨基形成稳定酰胺或硫脲键,保持蛋白质生物活性。
纯化与表征方法
纯化
偶联后的Sulfo-Cy3.5-Streptavidin可通过透析、凝胶过滤或层析分离未反应染料。
凝胶过滤色谱(Size-Exclusion Chromatography, SEC)常用于去除小分子杂质,保留高分子蛋白-染料复合物。
高效液相色谱(HPLC)也可用于进一步纯化,确保染料与蛋白质偶联比例可控。
表征
UV-Vis光谱:测定CY3.5吸收峰及蛋白质特征峰(280 nm),计算偶联比(Degree of Labeling, DOL)。
荧光光谱:验证荧光强度及发射峰是否保持,确保偶联后信号稳定。
SDS-PAGE:偶联前后蛋白质分子量变化可通过PAGE观察,同时荧光成像验证标记成功。
生物功能验证:通过生物素结合实验(如ELISA或亲和捕获)确认链霉亲和素结合能力未受损。
应用优势
高亲和力结合生物素,可用于荧光免疫检测、探针捕获及分子成像。
水溶性和稳定荧光保证在体内外实验条件下可靠使用。
可与多种生物体系兼容,实现多功能标记和定量分析。
产品名称:Sulfo-Cy3.5-Streptavidin,水溶性花菁染料CY3.5标记链霉亲和素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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