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Sulfo-CY3.5-Mal,水溶性花菁染料CY3.5标记马来酰亚胺的化学结构与特性

时间:2025-09-26 11:25:22       浏览:85
Sulfo-CY3.5-Mal,水溶性花菁染料CY3.5标记马来酰亚胺的化学结构与特性
水溶性花菁染料CY3.5标记马来酰亚胺(Sulfo-CY3.5-Mal)描述与合成步骤概述(约800字)
Sulfo-CY3.5-Mal是一种将水溶性花菁染料CY3.5与马来酰亚胺(Maleimide)功能基团偶联形成的荧光探针。马来酰亚胺是一种广泛用于巯基特异性偶联的化学基团,能够与蛋白质、肽或小分子上的自由硫醇(–SH)形成稳定的硫醚键。Sulfo修饰的CY3.5染料保证了在水相体系中的高溶解性和稳定性,同时保留了强烈的红光荧光,使其成为细胞标记、蛋白质标记及纳米材料表面功能化的理想工具。
化学结构与特性
CY3.5核心提供吸收峰约550–560 nm、发射峰约570–580 nm的红光荧光。
水溶性磺酸盐(Sulfo)增强在水溶液和生物体系中的分散性,减少非特异性吸附。
马来酰亚胺末端提供高特异性硫醇反应位点,可在温和条件下与蛋白质或巯基化分子偶联形成稳定硫醚键。
合成步骤概述
染料活化
选用CY3.5-NHS酯作为起始材料,通过磺酸盐修饰增加水溶性。
在有机溶剂(如DMF或DMSO)中,将CY3.5-NHS溶解,确保完全溶解且无水。
与马来酰亚胺偶联
在碱性缓冲条件下(pH 7–8),加入含有游离胺的马来酰亚胺衍生物。
通过亲核攻击,氨基与NHS酯反应形成稳定的酰胺键,将马来酰亚胺引入染料分子末端。
反应温和,通常在室温下进行1–2小时,避免染料光漂白和分子降解。
反应终止与初步纯化
通过加入羟胺或过量缓冲液终止未反应的NHS酯。
初步纯化可通过硅胶柱层析或透析去除未反应小分子和副产物。
终纯化与表征
高效液相色谱(HPLC)分离得到纯净Sulfo-CY3.5-Mal。
通过UV-Vis光谱和荧光光谱确认染料的吸收和发射特性。
质谱或NMR可用于确认马来酰亚胺偶联的化学结构。
应用优势
可实现蛋白质或肽的巯基特异性荧光标记。
水溶性保证在生物体系中高效溶解,减少非特异性结合。
稳定荧光适合活细胞成像、荧光追踪及纳米材料功能化。
产品名称:Sulfo-CY3.5-Mal,水溶性花菁染料CY3.5标记马来酰亚胺
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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