四甲基罗丹明标记酪蛋白钙肽的合成步骤概述
四甲基罗丹明（Tetramethylrhodamine, TAMRA）标记酪蛋白磷肽（Casein Phosphopeptide, CPP）是一种将荧光染料与磷酸化多肽共价结合的功能化分子。CPP 是从酪蛋白酶解产生的短肽片段，富含磷酸化丝氨酸残基，具有高亲钙性和生物活性，可用于钙离子调控、营养研究及生物分子成像。TAMRA 荧光基团吸收波长约 550 nm，发射波长约 580 nm，具有优异的光稳定性和量子产率，适用于细胞水平及体外荧光检测。
合成步骤概述
原料准备
TAMRA-NHS 酯作为活化荧光基团，水溶性良好，可在水性缓冲液中稳定存在。
CPP 多肽溶解于 pH 7–8 的缓冲液中（如 PBS 或碳酸氢盐缓冲液），保证其结构完整性和氨基暴露状态。
偶联反应
TAMRA-NHS 酯通过酰胺化反应与 CPP 多肽中的自由氨基（N 端或赖氨酸残基 ε-氨基）发生亲核攻击。
反应条件温和，通常在室温或 4°C 下进行，pH 控制在 7–8，避免多肽降解和磷酸基团水解。
反应过程中释放 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS），形成稳定的酰胺键，将 TAMRA 分子牢固地连接在 CPP 上。
反应时间与监控
反应时间一般为 2–6 小时，可通过紫外-可见光吸收峰（550 nm）监控偶联进程。
为确保高标记效率，可适当使用轻微过量的 TAMRA-NHS 酯。
纯化与分离
完成偶联后，采用透析或超滤去除未反应的 TAMRA-NHS 酯及副产物。
高效液相色谱（HPLC）进一步纯化，确保单一组分，获得高纯度 TAMRA-CPP。
终产品处理与储存
纯化后的 TAMRA-CPP 可冻干保存，保持荧光性能和生物活性。
储存于 –20°C 避光条件下，可长期稳定保存。
应用价值
荧光标记钙结合肽，研究钙离子与多肽相互作用。
用于体外成像及营养学研究，追踪多肽吸收和分布。
可修饰纳米载体，实现钙靶向递送及可视化追踪。
产品名称：四甲基罗丹明标记酪蛋白钙肽
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc