CY5-HSA是一种将近红外荧光染料CY5（Cyanine5）通过化学偶联修饰到人血清白蛋白（HSA, Human Serum Albumin）上的功能化分子。人血清白蛋白是一种约66 kDa的血浆蛋白，含有多个赖氨酸残基提供氨基官能团，可用于偶联荧光染料构建可视化标记物。CY5-HSA兼具HSA的生物兼容性和体内分布特性，以及CY5的深红至近红外荧光信号特性，广泛应用于生物成像、药物载体标记及蛋白质相互作用研究。

二、合成过程研究

CY5-HSA的合成通常包括以下几个关键步骤：

1. HSA溶解与缓冲体系准备

   • HSA溶解于缓冲液（如PBS, pH 7.4–8.0），确保氨基官能团处于可反应状态。

   • 适当控制蛋白质浓度，以避免染料过量导致蛋白质沉淀或结构改变。

2. CY5活化及溶解

   • 选择含活性基团的CY5（如CY5-NHS酯）溶解于适宜溶剂（DMSO或缓冲液）中。

   • 避免长时间光照，以防染料光漂白，保持活性。

3. 偶联反应

   • 缓慢将CY5溶液加入HSA溶液中，在弱碱性条件下（pH 7.5–8.5）孵育数小时至过夜。

   • 反应过程中，CY5-NHS酯的碳原子被HSA赖氨酸氨基攻击，形成稳定酰胺键。

   • PEG或其他空间柔性修饰可用于减少空间阻碍，提高偶联效率。

4. 纯化与去除未反应组分

   • 通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除游离CY5，得到纯净的CY5-HSA。

   • 确保产物水溶性良好、荧光强度稳定，同时避免蛋白质聚集或变性。

5. 产物表征

   • 采用紫外-可见光谱（UV-Vis）和荧光光谱确认CY5标记成功与荧光性能。

   • SDS-PAGE和质谱（MS）可用于分析偶联效率和蛋白质完整性。

   • 荧光寿命和量子产率测定可评估染料与蛋白质偶联后的光学性能。

用途：科研

推荐产品：

CY5.5标记β-谷甾醇 CY5.5-β-Sitosterol
CY5.5标记阿兹夫定 CY5.5-Azvudine
CY5.5标记白桦脂酸 CY5.5-Betulinic acid
CY5.5标记丙泊酚 CY5.5-propofol
CY5.5标记丙烯酸羟乙酯 CY5.5-2-Hydroxyethyl acrylate