AF633 Maleimide的反应机理
AF633 Maleimide 是一种以 Alexa Fluor 633（AF633）为骨架的远红荧光染料活性衍生物，其末端含有马来酰亚胺（Maleimide, Mal）官能团，可特异性与蛋白质或小分子中的巯基（–SH）共价偶联，形成稳定的硫醚键。AF633 激发峰约在 633 nm，发射峰约 658 nm，属于远红光区域，具有低自发荧光、高信噪比、穿透组织能力强的优点，非常适合细胞成像、流式细胞术、免疫染色及生物分子追踪。
AF633 Maleimide 的设计结合了三大功能：
1）远红荧光染料：可实现低背景的深部成像；
2）巯基特异性偶联位点（Maleimide）：与半胱氨酸残基或巯基修饰分子形成稳定共价键；
3）水溶性优化：通过染料本身或衍生磺酸基提高水相溶解性和生物相容性。
反应机理
核心机理为Michael 加成反应：Maleimide 双键是α,β-不饱和酰亚胺，电子密度低，易受到巯基亲核攻击。反应步骤如下：
亲核进攻
半胱氨酸的巯基（–SH）作为亲核试剂攻击 Maleimide 双键的 β-碳原子，形成过渡态。
形成硫醚键
双键断裂，巯基与 Mal 的 β-碳形成稳定的C–S共价键，生成加成产物。
此反应一般在中性至微碱性环境（pH 6.5–7.5）下进行，反应速率快，可在室温下完成。
选择性优势
Maleimide 对巯基选择性高，对氨基、羟基或羧基反应性低，偶联定位精准。
生成的硫醚键在生理条件下稳定，不易水解或断裂。
反应条件注意
高pH或含大量还原剂可能导致 Maleimide 水解或副反应；
高浓度巯基或多巯蛋白可能引起多重标记，需要控制摩尔比。
产品名称：AF633 Maleimide
纯度：95%+
规格：mg/g

用途：科研

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc