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iFluor 546酪胺用于活细胞标记、免疫荧光及酶活性追踪

时间:2025-10-14 11:47:49       浏览:74
iFluor 546酪胺用于活细胞标记、免疫荧光及酶活性追踪
iFluor 546 酪胺是一种将橙红色荧光染料 iFluor 546 与酪胺(tyramine)衍生物共价连接的功能化探针,用于活细胞标记、免疫荧光及酶活性追踪。iFluor 546 是一种高亮度荧光染料,其激发峰约在 546 纳米,发射峰约在 570 纳米,具备高量子产率、优异光稳定性和良好的水溶性,适用于多色荧光成像。酪胺部分的结构含有酚羟基和伯氨基,可通过化学偶联与蛋白、酶或多糖载体形成稳定的共价键,使染料在生物体系中实现特异标记。iFluor 546 酪胺因此在细胞标记、酶活性成像及药物递送研究中具有应用价值。
其反应机制主要基于 NHS 酯偶联原理。首先,将 iFluor 546 羧基活化为 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester),形成亲电中心,为后续反应提供可控活性位点。酪胺的伯氨基作为亲核试剂攻击 NHS 酯的碳原子,形成过渡态四面体中间体,并通过离去 N-羟基琥珀酰亚胺分子,生成稳定的酰胺键。这一亲核取代反应具有高选择性,只在伯氨基上进行,避免了酚羟基或其他官能团的非特异性反应。
在反应过程中,缓冲体系和溶剂条件至关重要。反应通常在 pH 7.5–8.5 的中性或弱碱性缓冲液中进行,以保证伯氨基非质子化状态并维持亲核活性,同时避免染料的光降解。为改善 iFluor 546 的溶解性,反应体系可加入少量水溶性有机溶剂如 DMF 或 DMSO。偶联反应一般在室温下进行数小时,以确保高效率的酰胺键形成。
反应完成后,通过高效液相色谱(HPLC)或凝胶渗透色谱进行纯化,以去除未反应的染料、游离酪胺及副产物。纯化后的 iFluor 546 酪胺通常经过质谱(MALDI-TOF 或 ESI-MS)确认分子量,紫外-可见光谱和荧光光谱验证光学性能,确保其保持橙红色荧光信号和化学活性。
整体来看,iFluor 546 酪胺的反应机制核心在于 NHS 酯活化羧基与酪胺伯氨基的亲核取代形成稳定酰胺键。该反应选择性高、温和且可控,既保证了染料的荧光性能,又保持了酪胺的生物活性,使其成为活细胞标记、酶活性检测和化学偶联研究中的理想工具。
产品名称:iFluor 546酪胺
纯度:95%+
规格:mg/g

用途:科研


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