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AF568标记的链霉亲和素

时间:2025-11-10 16:31:55       浏览:1
产品名称:AF568标记的链霉亲和素
1. 核心结构与化学特性
链霉亲和素(Streptavidin):
四聚体结构:由四个相同亚基(每个含159个氨基酸残基)组成,分子量约66 kDa,形成四个生物素结合位点,解离常数低至10⁻¹⁴ M,实现超稳定结合。
低非特异性结合:中性等电点(pH 6.0)、无糖基化修饰,减少与带电分子或糖受体的非特异性吸附,提升实验信噪比。
耐受性:耐受极端pH(2-11)、高温(≤70℃)、有机溶剂及变性剂,适配多样化实验条件。
AF568荧光染料:
荧光特性:激发波长578 nm,发射波长603 nm,属橙红色荧光,量子产率高,抗光漂白能力强,适合长时间成像。
水溶性:可溶于水及有机溶剂(如DMSO、DMF),便于标记反应操作。
反应活性:通过NHS酯或马来酰亚胺基团与链霉亲和素的赖氨酸或半胱氨酸残基共价偶联,形成稳定复合物。
结合物特性:
分子量:约54.2-55.5 kDa(含2-4个AF568分子),每个链霉亲和素四聚体可结合4个生物素分子,实现信号放大。
储存条件:避光、-20℃干燥保存,避免反复冻融;复溶溶液可加入叠氮化钠或硫柳汞防腐,延长稳定性。
2. 作用机制与技术创新
生物素-链霉亲和素系统:
高特异性结合:链霉亲和素与生物素化分子(如抗体、核酸、蛋白质)通过非共价键形成超稳定复合物,解离常数极低,确保标记的精准性。
信号放大:四聚体结构支持多价结合,单个生物素化靶分子可结合多个AF568-链霉亲和素,显著增强荧光信号,提升检测灵敏度(如ELISA灵敏度提升5-20倍)。
低背景干扰:链霉亲和素的中性等电点和无糖基化特性减少非特异性吸附,降低假阳性风险。
荧光标记优势:
高亮度与光稳定性:AF568的强荧光信号和抗光漂白能力支持高分辨率成像,适配多色标记(如与GFP、Cy系列染料联用)。
多模态兼容性:适用于流式细胞术、共聚焦显微镜、免疫荧光、Western Blot等多种检测平台,支持多参数分析。


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