Alexa Fluor 488酪胺（Alexa Fluor 488 Tyramide，简称AF488-TSA）是一种以Alexa Fluor 488荧光团为核心的信号放大型标记试剂，属于酪胺信号放大系统（Tyramide Signal Amplification, TSA）系列。该试剂通过在分子末端引入酪胺结构，使其在过氧化物酶（HRP, Horseradish Peroxidase）催化下与组织或细胞内的酚羟基残基发生共价结合，从而将荧光分子永久固定在靶位点。与常规的直接荧光标记或二抗荧光法相比，AF488-TSA可实现更高灵敏度、更强信号强度及更低的背景噪声，特别适合检测低丰度的蛋白或核酸靶标。

Alexa Fluor 488是一种明亮且稳定的绿色荧光染料，激发峰位于约495纳米，发射峰约519纳米，能够与常见的FITC通道兼容。其光稳定性高、荧光量子产率大且对pH变化不敏感。与传统荧光素相比，Alexa Fluor 488在光漂白耐受性、信号保持时间及光学清晰度方面表现更优。因此，将其与酪胺结合后得到的AF488-TSA兼具高荧光性能与酪胺的酶促共价结合能力，可在复杂生物样品中实现高分辨率标记与显色。

生物应用

AF488-TSA的应用原理基于HRP催化的酪胺信号放大机制。在免疫检测中，首先使用带有HRP标记的抗体或探针识别目标分子；随后加入AF488-TSA和少量过氧化氢，在HRP作用下，酪胺被氧化为活性中间体（自由基），该中间体可与邻近的酚羟基或酪氨酸残基共价结合，将Alexa Fluor 488分子牢固固定在靶点上。这种酶促共价反应具有高空间特异性，使得信号定位准确且不易扩散，从而显著提高图像分辨率与检测灵敏度。

在免疫组化（IHC）和免疫荧光（IF）实验中，AF488-TSA常用于检测低表达或稀有的蛋白标志物。例如，在组织切片或细胞样本中，可通过HRP偶联二抗与AF488-TSA反应，获得远强于直接荧光抗体的信号。由于酪胺放大机制可将单个酶分子转化为多个荧光标记点，信号可放大数十倍甚至上百倍，适用于微量目标分子的定性或定量分析。

在多重荧光染色中，AF488-TSA常与其他波长的酪胺试剂（如AF555-TSA、AF647-TSA等）联合使用。通过在每次放大反应后进行HRP失活或封闭处理，可实现多轮染色与显色，从而在同一组织或细胞样品中实现多靶标检测。由于Alexa Fluor 488具有较窄的发射光谱带宽，能够与红、远红及蓝光通道区分开，因此可与DAPI、AF594、AF647等染料联合使用进行多色成像。

AF488-TSA还被广泛应用于原位杂交（ISH）及原位PCR检测中。在这些实验中，探针通常带有HRP标记，通过AF488-TSA反应实现信号放大，增强核酸探针检测的灵敏度。其高信噪比特性使其适合用于单细胞层面的核酸定位研究及低拷贝RNA分子的检测。此外，AF488-TSA的稳定荧光信号适合长时间成像和高倍率扫描，常用于共聚焦显微镜或激光扫描显微镜分析。

在蛋白质研究领域，AF488-TSA可用于增强免疫印迹（Western blot）信号。通过HRP标记抗体催化AF488-TSA反应，可在膜上形成持久的荧光信号，方便使用荧光扫描仪进行多通道检测，取代传统化学发光方法。这种方式信号均一、可重复性高，便于定量分析。

厂家：瑞禧生物

产品目录

CY7标记顺铂 CY7-cisplatin
CY7标记丝状蛋白 CY7-Filamin
CY7标记羧甲基壳聚糖 CY7-Carboxymethyl chitosan
CY7标记羧甲基纤维素钠 CY7-Carboxymethylcellulose-sodium
CY7标记羧甲基纤维素钠 CY7-CMC