AF430 WGA 是一种由小麦胚芽凝集素（Wheat Germ Agglutinin, WGA）与 Alexa Fluor 430（AF430）荧光染料偶联形成的标记蛋白。WGA 是一种糖结合蛋白，能够特异识别含有 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和唾液酸残基的糖蛋白或糖脂，广泛应用于细胞膜染色、糖链分析及组织示踪研究。Alexa Fluor 430 是一种激发波长约为 430 纳米、发射波长约为 540 纳米的绿色至黄绿色荧光染料，具有水溶性、光稳定性好及低自发荧光背景等特性。AF430 WGA 的设计原理在于结合 WGA 的糖结合功能与 AF430 的荧光特性，实现高灵敏、特异的生物标记。

从结构上分析，AF430 WGA 由三部分组成：WGA 蛋白主体、荧光染料分子和偶联连接链。WGA 蛋白为四聚体，每个亚基含有多个赖氨酸残基氨基，可作为荧光偶联的反应位点。Alexa Fluor 430 的结构中含有活性官能团（通常为 N-羟基琥珀酰亚胺 NHS 酯或异硫氰酸酯），能够与蛋白氨基共价结合形成酰胺键或硫代脲键。偶联连接链通常为短链有机结构，保证染料与蛋白之间的空间距离，使偶联不会阻碍 WGA 的糖结合活性。该结构设计确保蛋白保留生物识别功能，同时染料提供可检测的荧光信号。

AF430 WGA 的合成主要通过化学偶联实现。首先，将 WGA 溶解在适宜缓冲液中，常用 pH 7.5–8.5 的磷酸盐或碳酸盐缓冲液，使蛋白赖氨酸残基保持良好的亲核性。随后将 AF430 的活性酯溶液缓慢加入蛋白溶液中，在温和条件下进行反应。反应过程中，NHS 酯碳原子被赖氨酸氨基进攻，形成稳定的酰胺键，从而完成染料与蛋白的共价偶联。整个反应通常在低温避光条件下进行，以避免蛋白变性和染料光漂白。

在合成过程中，需要严格控制染料与蛋白的摩尔比。过量的荧光染料会导致蛋白分子过度修饰，引起空间构象改变，降低糖结合能力；而染料不足则会降低荧光强度。通过优化摩尔比、反应时间及缓冲条件，可以实现荧光强度与蛋白活性之间的平衡。反应结束后，通过透析、凝胶过滤或层析方法去除未结合的游离染料，以获得纯化的 AF430 WGA 产品。

从结构功能角度来看，AF430 WGA 的空间构型设计具有重要意义。短连接链在蛋白与染料之间提供适度的柔性，使荧光基团在空间上远离 WGA 的糖结合位点，从而不会影响蛋白与糖链的结合能力。WGA 本身的糖结合位点多为芳香族残基和极性氨基酸构成，通过氢键和范德华力识别糖分子末端的 N-乙酰葡糖胺或唾液酸残基。偶联染料与蛋白的稳定结合确保在显微成像过程中能够提供高信噪比的荧光信号。

AF430 WGA 的化学性质和生物应用紧密相关。其荧光染料具有良好的光稳定性，可在共聚焦显微镜或多通道荧光成像中保持信号稳定；WGA 蛋白的糖结合活性在偶联后仍可保持，可用于细胞膜染色、组织切片标记及细胞内糖链追踪。由于偶联反应在温和缓冲条件下完成，蛋白的三维结构和功能位点不受显著破坏，保证了其在生物体系中的兼容性和功能性。

厂家：瑞禧生物

产品目录

ICG-Transferrins 吲哚菁绿标记转铁蛋白
ICG-UrolithinA 吲哚菁绿标记尿石素A
ICG-Ursodeoxycholic acid   吲哚菁绿熊去氧胆酸
ICG-Zingibroside R1 吲哚菁绿标记姜状三七苷R1
ICG-藏红花 ICG-saffron