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CY3-SODN19,CY3标记的SODN19的反应条件

时间:2025-12-09 09:52:41       浏览:50
CY3-SODN19,CY3标记的SODN19的反应条件

CY3-SODN19 指在寡核苷酸 SODN19 上共价引入 Cy3 花菁染料后形成的荧光标记核酸体系。该分子体系主要由三部分组成:SODN19 寡核苷酸链、连接臂段以及 Cy3 荧光团。SODN19 是一条 19 个碱基长度的单链寡核苷酸,具有序列特异性,可在体外实验中用于基因调控、配对识别或探针分析。Cy3 属于三甲烯型花菁染料,由两个氮杂芳香环通过多甲烯链连接形成连续 π 共轭体系,具有约 550 nm 的吸收峰和约 570 nm 的发射峰,可为寡核苷酸提供可视化荧光信号,用于监测其行为和分布。

CY3-SODN19 的标记通常依赖于化学反应,将活化的 Cy3 分子与 SODN19 上预先设计的反应位点共价结合。常用的标记方式包括 Cy3-NHS 酯与寡核苷酸末端或修饰氨基的亲核加成反应,以及通过点击化学 [3+2] 环加成实现稳定三唑环连接。反应条件是影响标记效率和寡核苷酸稳定性的重要因素,需在温和可控的条件下进行,以保证荧光信号稳定且不破坏 SODN19 链结构。

一般反应条件如下:首先,SODN19 需要在适度缓冲液中溶解,通常使用弱碱性条件(pH 7.5–8.5),以使末端氨基保持适度去质子化状态,提高亲核活性。过高或过低 pH 会导致 RNA/DNA 链的水解或降解。反应温度通常控制在室温或略低,以避免热诱导的寡核苷酸变性或构象变化。反应时间一般在数小时范围内,根据染料浓度和反应位点数量进行优化,确保充分反应但避免副反应产生。

在溶液中,Cy3-NHS 酯通常溶解于少量无水有机溶剂(如 DMSO),然后缓慢加入 SODN19 溶液,保证溶液均匀混合,减少局部高浓度导致的副反应。若采用点击化学标记,则需在 RNA/DNA 链上预修饰叠氮或炔基,并在铜催化剂存在下进行环加成反应,该方法温和、选择性高,反应速度快,生成的三唑环具有良好的稳定性和耐水性。

反应完成后,需要通过透析、凝胶过滤或反相高效液相色谱(HPLC)去除未反应的自由染料及副产物,以获得纯净的 CY3-SODN19。纯化后的标记寡核苷酸在水相中分散良好,带负电荷,荧光性质稳定,可在体外实验或细胞体系中实现可视化追踪。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:CY3-SODN19
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

CY7.5标记卵清蛋白 cy7.5-Ovalbumin
CY7.5标记氯霉素 CY7.5-Chloramphenicol
CY7.5标记氯叶绿素e Cy7.5-Ce6
CY7.5标记莫能菌素 CY7.5-Monensin
CY7.5标记牛血清白蛋白 CY7.5-BSA

仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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