5-TAMRA C12 Amidite (5-Isomer) 的中文名称通常为5-位异构体 TAMRA C12 磷酰胺化物,亦可称为5-位 6-羟基四甲基罗丹明 C12 磷酰胺试剂。其中,“TAMRA”代表四甲基罗丹明(Tetramethylrhodamine)荧光染料,“C12”表示通过十二碳连接臂与核苷酸链相连,“Amidite”说明其为磷酰胺化中间体,可在固相寡核苷酸合成中引入荧光标记;“5-Isomer”表示该染料的羧基位于分子 5 位,为单一异构体,可获得一致的化学反应行为和荧光性质。
二、功能特点
荧光标记功能:5-TAMRA C12 Amidite 可在寡核苷酸链上提供橙红色荧光信号,最大激发波长约 555 nm,发射波长约 580 nm。该波长范围适合多通道荧光分析,可与其他荧光染料组合使用。
空间延展性:C12 十二碳连接臂可将 TAMRA 荧光团从核酸主链延伸出来,减少对双链构象和碱基配对的干扰,同时提高荧光团在杂交或结合反应中的可接近性。
化学稳定性:磷酰胺化试剂在无水、惰性条件下稳定,可通过固相合成方法引入寡核苷酸中。在合成过程中,DMT 或其他保护基控制羟基的反应性,确保偶联效率和产物纯度。
异构体单一性:使用 5 位异构体可确保标记位置和空间构象一致,提高实验重复性和荧光信号的稳定性。
三、应用领域
荧光探针和引物标记:该试剂常用于在寡核苷酸 5′ 或内部位置引入荧光标签,用于 PCR、实时定量检测、荧光原位杂交(FISH)及其他分子检测实验。
分子成像与追踪:由于 TAMRA 荧光稳定且可在生物体系中检测,修饰后的寡核苷酸可用于细胞内或体外核酸动态观察、定位和追踪实验。
多重荧光分析:5-TAMRA C12 可与其他不同发射波长的荧光染料联合使用,实现多通道检测和信号分离,适合复杂生物样品分析。
结构功能研究:通过在核酸链特定位点引入荧光标记,可以研究核酸构象变化、杂交效率及探针与靶分子的相互作用,为分子生物学和生物物理学研究提供工具。
四、总结
5-TAMRA C12 Amidite (5-Isomer) 结合了稳定的荧光性质、空间延展性和化学可控性,是寡核苷酸荧光标记的重要工具。其功能和应用涵盖探针制备、分子检测、成像追踪及核酸结构研究等领域,为生命科学实验提供高灵敏度和高可重复性的分析手段。

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