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Cy3-a-Bungarotoxin,Cy3 荧光标记 α-眼镜蛇毒素的合成路线

时间:2025-12-24 10:13:02       浏览:50
Cy3-a-Bungarotoxin,Cy3 荧光标记 α-眼镜蛇毒素的合成路线

一、中文名称
Cy3-α-Bungarotoxin 的中文名称通常为Cy3 荧光标记 α-眼镜蛇毒素,也可称作Cy3 修饰 α-蛇毒素。其中,α-Bungarotoxin 是来源于眼镜蛇毒液的小型多肽蛋白,能够特异性结合尼古丁型乙酰胆碱受体(nAChR);Cy3 是一种橙红色荧光染料,具有高亮度和良好光稳定性。该标记分子用于受体定位、荧光示踪及神经科学研究。

二、分子结构特点
Cy3-α-Bungarotoxin 分子由三部分组成:

  1. α-Bungarotoxin 多肽骨架:保持特异性结合 nAChR 的活性结构。

  2. 柔性间隔或连接臂(可选):部分制备方案中在 Cy3 与蛋白质之间引入 PEG 或小型间隔链,以减少染料对蛋白构象的干扰。

  3. Cy3 荧光染料端:通过共价键与蛋白质偶联,提供橙红色荧光信号(激发约 550 nm,发射约 570 nm),适合荧光成像和多通道实验。

三、合成路线概述
Cy3-α-Bungarotoxin 的合成路线主要包括染料活化、蛋白溶解、偶联反应、纯化及质量验证五个步骤:

  1. 荧光染料活化
    Cy3 荧光染料通常以 N-羟基琥珀酰亚胺酯形式存在(Cy3-NHS)。通过活化羧基形成 NHS-酯,使其能够在温和条件下与蛋白质的伯胺基共价结合。

  2. α-Bungarotoxin 溶解与缓冲准备
    将 α-Bungarotoxin 溶解于缓冲液(如 PBS,pH 7.2–7.4),保证蛋白质结构完整。缓冲液中不含氨基或巯基干扰物,以避免副反应。蛋白质浓度一般控制在 1–5 mg/mL,以提高偶联效率。

  3. 偶联反应
    在轻柔搅拌条件下,将 Cy3-NHS 缓慢加入 α-Bungarotoxin 溶液。NHS-酯端的活性羰基与 α-Bungarotoxin 伯胺基形成稳定的酰胺键。反应通常在室温或低温下进行 1–2 小时,保证荧光标记的同时维持蛋白质受体结合活性。

  4. 纯化
    通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的游离 Cy3 和副产物,获得纯净的 Cy3-α-Bungarotoxin。纯化过程中需避光操作,以防荧光衰减。

  5. 质量验证
    使用 UV-Vis 光谱、荧光光谱和 SDS-PAGE 检测标记效率和蛋白质完整性。荧光信号应显示 Cy3 的特征发射峰(约 570 nm),并可通过受体结合实验验证 α-Bungarotoxin 功能活性。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:Cy3-a-Bungarotoxin,Cy3 荧光标记 α-眼镜蛇毒素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

CY5.5-纤维蛋白原
FITC-PE
异硫氰酸荧光素-磷脂酰乙醇胺
CY3-Lysozyme
CY3-溶菌酶
FITC-ConA
异硫氰酸酯-刀豆球蛋白A

仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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