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产品名称:FITC-Phenylboronic acid,FITC标记苯硼酸,FITC-PBA的纯度检测方法
1. 核磁共振(NMR)
结构验证:通过¹H NMR和¹³C NMR确认偶联成功及化学结构。
特征峰:苯硼酸(PBA)的苯环质子(δ7.2-7.8ppm)与FITC的芳香质子(δ6.5-7.0ppm)峰面积比接近1:1,表明硫脲键形成。二维NMR(如COSY、HSQC)可解析糖链连接方式及空间构象。
定量分析:通过积分面积计算偶联比(DOL),确保生物活性与荧光性能平衡。
2. 质谱(MS)
分子量确认:高分辨率质谱(HRMS)测定分子量,FITC-PBA理论分子量为400.38(C₂₄H₁₆O₆),匹配误差≤5ppm。
杂质检测:通过LC-MS联用技术识别未反应单体、降解产物及合成副产物,确保无显著杂质峰。
3. 紫外-可见光谱(UV-Vis)
纯度筛查:扫描400-600nm波长范围,游离FITC在495nm处有强吸收,纯化后该峰强度应低于总吸收的5%。激发/发射波长偏差≤±2nm(激发495-500nm/发射515-525nm),确保荧光特性一致。
定量分析:结合比尔-朗伯定律计算浓度,验证标称纯度与实际含量一致性。
4. 荧光性能评估
量子产率(QY):以罗丹明B为标准品,通过相对法计算QY≥0.3(水溶液中),保证荧光亮度。光稳定性测试(如激光照射488nm/532nm)记录半衰期≥2小时,确保成像实验可靠性。
光谱特性:固定激发波长测定发射峰强度,与标准品校准曲线对比,验证荧光强度一致性。
5. 稳定性与安全性测试
热稳定性:差示扫描量热法(DSC)测定玻璃化转变温度(Tg)或热分解温度(Td)≥100℃,避免储存降解;-20℃或-80℃长期储存稳定性测试(3个月纯度变化≤5%)。
水解稳定性:37℃、pH7.4 PBS缓冲液中孵育7天,HPLC检测纯度保留率≥90%。
生物相容性:MTT法评估细胞毒性,IC50≥10μM(体外安全浓度);体内生物相容性通过小动物实验验证无显著炎症或组织损伤。

关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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定量分析:通过积分面积计算偶联比(DOL),确保生物活性与荧光性能平衡。
2. 质谱(MS)
分子量确认:高分辨率质谱(HRMS)测定分子量,FITC-PBA理论分子量为400.38(C₂₄H₁₆O₆),匹配误差≤5ppm。
杂质检测:通过LC-MS联用技术识别未反应单体、降解产物及合成副产物,确保无显著杂质峰。
3. 紫外-可见光谱(UV-Vis)
纯度筛查:扫描400-600nm波长范围,游离FITC在495nm处有强吸收,纯化后该峰强度应低于总吸收的5%。激发/发射波长偏差≤±2nm(激发495-500nm/发射515-525nm),确保荧光特性一致。
定量分析:结合比尔-朗伯定律计算浓度,验证标称纯度与实际含量一致性。
4. 荧光性能评估
量子产率(QY):以罗丹明B为标准品,通过相对法计算QY≥0.3(水溶液中),保证荧光亮度。光稳定性测试(如激光照射488nm/532nm)记录半衰期≥2小时,确保成像实验可靠性。
光谱特性:固定激发波长测定发射峰强度,与标准品校准曲线对比,验证荧光强度一致性。
5. 稳定性与安全性测试
热稳定性:差示扫描量热法(DSC)测定玻璃化转变温度(Tg)或热分解温度(Td)≥100℃,避免储存降解;-20℃或-80℃长期储存稳定性测试(3个月纯度变化≤5%)。
水解稳定性:37℃、pH7.4 PBS缓冲液中孵育7天,HPLC检测纯度保留率≥90%。
生物相容性:MTT法评估细胞毒性,IC50≥10μM(体外安全浓度);体内生物相容性通过小动物实验验证无显著炎症或组织损伤。

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西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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