ATTO 425 Acid（CAS：652966-03-5），中文名称为ATTO 425 羧酸，是 ATTO 荧光染料家族中基于香豆素骨架构建的短波长紫蓝色荧光探针，也是该系列活性衍生物的核心合成前体，在荧光标记与材料化学领域占据基础地位。其分子式为 C₂₂H₂₇NO₆，分子量 401.46，外观为深蓝色固体粉末，纯度通常≥95%，需在避光、干燥、-20℃条件下密封储存，避免反复冻融以维持结构稳定。

从分子结构看，ATTO 425 Acid 以香豆素母核为荧光发色团，侧链连接羧基（-COOH）与烷基取代基，刚性共轭结构赋予其稳定的光物理特性。光学性能上，该染料*大激发波长约 425nm，*大发射波长 448nm，呈现明亮的紫蓝色荧光，斯托克斯位移约 60nm，能有效区分激发与发射信号，减少光谱干扰。其荧光量子产率约 0.50，虽非*高，但光稳定性优异，耐受常规荧光显微镜的紫外 - 紫色激发（400-450nm），抗光漂白能力优于多数同波段香豆素染料，适配长时间成像观测。在多色荧光标记实验中，其紫蓝色光谱与绿色（ATTO 488）、红色（ATTO 647）、近红外染料无明显重叠，可实现四色及以上多靶标同步标记，清晰区分不同检测信号。

化学特性上，羧基是 ATTO 425 Acid 的核心功能基团，赋予其高反应活性。在碳二亚胺类活化剂（如 EDC/NHS）作用下，羧基可快速转化为活性酯中间体，与蛋白质、多肽、抗体、核酸等生物分子的氨基发生酰胺化反应，形成稳定共价键，实现荧光标记。相较于直接使用活性酯衍生物，ATTO 425 Acid 作为基础母体，储存稳定性更强，可按需现场活化，避免预活化产物易水解、保质期短的缺陷，适配实验室灵活的标记需求。同时，该染料兼具中等亲水性，可溶于 DMF、DMSO 等有机溶剂，在水相缓冲液中也有一定溶解度，兼容有机相合成与水相生物标记体系。

应用层面，ATTO 425 Acid 主要作为荧光标记中间体与材料改性试剂使用。在生物科研中，用于标记抗体、蛋白、核酸等，适配荧光显微镜成像、流式细胞术、免疫荧光检测等场景，尤其适合对细胞内微结构、生物大分子相互作用的高精度观测。在材料领域，可通过羧基偶联修饰纳米颗粒、聚合物、量子点表面，赋予材料紫蓝色荧光特性，用于纳米材料追踪、自组装结构表征、传感器构建等研究。此外，其作为合成前体，可通过羧基衍生化制备 ATTO 425 NHS 酯、马来酰亚胺、胺基等多种活性衍生物，拓展荧光标记的反应类型与应用场景。

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