ATTO 425 NHS（CAS：892156-28-4），中文名称为ATTO 425 琥珀酰亚胺酯（（又称 ATTO 425 活性酯、ATTO 425 SE），是 ATTO 425 Acid 的 N - 羟基琥珀酰亚胺活化衍生物，专为生物分子氨基的高效、选择性荧光标记设计，是生物成像与分子检测领域常用的活性荧光染料。其分子式为 C₂₆H₃₀N₂O₈，分子量 498.53，外观为橙红色固体粉末，易溶于 DMF、DMSO 及少量水溶液，需严格避光、-20℃冷冻储存，现配现用以避免水解失活。

分子结构上，ATTO 425 NHS 保留了 ATTO 425 的香豆素荧光母核，将羧基替换为琥珀酰亚胺酯（NHS ester）活性基团，这种结构改造直接提升了分子的反应活性与选择性。光物理特性与母体染料一致，*大激发波长 437nm，发射波长 483nm，紫蓝色荧光信号清晰，光谱纯净，量子产率稳定，刚性结构消除顺反异构导致的荧光闪烁，标记后信号强度均匀、光谱偏移*小，适配单分子检测与高分辨率显微镜成像。其抗光漂白性能突出，在活细胞长时间观测、多次扫描成像中，荧光信号衰减缓慢，优于传统荧光素、罗丹明类氨基标记染料。

反应特性是 ATTO 425 NHS 的核心优势。NHS 酯基团对生物分子中的初级氨基（-NH₂）具有高度特异性，在温和条件（pH 7.0-8.0，室温或 4℃）下即可快速反应，无需额外活化剂，1-2 小时内即可完成标记，形成稳定的酰胺键，标记效率可达 80% 以上。该反应选择性强，优先与蛋白质 N 端氨基、赖氨酸侧链氨基结合，基本不与巯基、羟基、羧基等其他基团反应，减少非特异性标记，保证标记产物的纯度与信号特异性。同时，标记反应条件温和，不破坏生物分子的空间结构与生物活性，适配抗体、酶、生长因子等活性蛋白的标记需求。

应用场景上，ATTO 425 NHS 是生物医学与生命科学研究的高效工具。在细胞生物学中，用于标记膜蛋白、胞内骨架蛋白、细胞器特异性蛋白，实现活细胞内蛋白定位、转运、相互作用的可视化观测。在分子生物学中，标记氨基修饰的寡核苷酸、siRNA，用于核酸原位杂交、基因表达检测、分子信标构建，适配实时荧光定量 PCR、单细胞测序等技术。在免疫检测中，标记一抗或二抗，用于免疫荧光染色、流式细胞术分析、免疫组化检测，实现抗原的精准定位与定量。此外，可用于纳米材料、微球、生物芯片表面的氨基修饰与荧光标记，构建高灵敏度生物传感器、高通量检测芯片，在环境监测、食品安全检测等领域发挥作用。

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