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Sulfo-CY5 DBCO(水溶性Cy5 DBCO,DBCO-Sulfo-Cy5,CAS: 1564286-24-3)是一种结合了磺化Cy5红色荧光染料与DBCO点击化学基团的双功能水溶性探针。其激发波长为646 nm,发射波长为670 nm,荧光量子产率约为0.2,外观呈深蓝色至黑色固体。该化合物的分子量为929.03,分子式为C53H59N4F6O2P,在DMF、DMSO及水相缓冲液中均具有良好的溶解性。
从细胞成像的实践角度出发,Sulfo-CY5 DBCO的*大优势在于其"即插即用"的点击标记能力。研究人员只需将该探针与叠氮修饰的目标分子(如叠氮标记的抗体、叠氮化的细胞膜糖类等)在PBS或Tris缓冲液中混合,于室温反应30分钟至2小时即可完成标记,无需任何催化剂。推荐的摩尔比为Cy5-DBCO与叠氮化物1.2至1.5:1,反应完成后可通过透析、超滤或HPLC纯化去除未反应的游离探针。
值得特别注意的是,Sulfo-CY5 DBCO不适合对通透化细胞的胞内成分进行染色,因为其磺化基团导致的高水溶性使其难以穿透细胞膜,在胞内染色时会表现出较高的背景荧光。因此,该探针理想的应用场景是细胞表面标记——例如标记细胞表面的叠氮化糖链或叠氮修饰的膜蛋白,用于细胞分型、膜结构研究或细胞间相互作用分析。
在组织成像与小动物活体成像中,Sulfo-CY5 DBCO标记的探针同样表现出色。Cy5的红色荧光处于生物组织的"光学窗口"内,穿透深度可达数毫米,背景干扰*低。将其用于标记叠氮修饰的靶向肽(如RGD肽)后,可实时监测纳米药物在动物体内的靶向富集与代谢过程。该试剂纯度通常达95%以上,以冻干粉形式提供,推荐使用DMSO或无菌水溶解至1至10 mM浓度,-20℃避光保存可稳定12个月。

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