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AF 546 LEL,中文名称 AF546 标记的番茄凝集素,衍生英文别名 AF546 Tomato lectin、AF546 TL、LEL-AF546 Conjugate,是标准化偶联工艺制备的内皮细胞特异性荧光示踪剂,以 Lycopersicon esculentum 凝集素(LEL)为靶向载体,Alexa Fluor 546 为光学信号报告基团,侧重活体体外微循环动态观测与内皮细胞异质性分析,仅用于基础科研实验表征。
LEL 载体蛋白区别于其他植物凝集素,对内皮细胞表面高丰度表达的多聚 N - 乙酰葡萄糖胺具有专一识别性,无广谱非特异性吸附,仅结合血管内皮、小胶质细胞膜表面糖抗原,对上皮细胞、成纤维细胞结合能力*弱,天然具备内皮细胞分选标记潜力。偶联工艺采用温和氨基交联反应,每分子凝集素可稳定结合 3-5 个 AF 546 荧光基团,无染料自聚集导致的荧光猝灭,标记后蛋白等电点波动*小,不会改变凝集素在缓冲液中的溶解分散性能。Alexa Fluor 546 荧光基团适配 532nm、561nm 两种通用激光激发源,兼容主流共聚焦、双光子活体成像设备,长时间动态拍摄下荧光信号衰减速率远低于 FITC、TRITC 等传统染料,支持数十分钟活体微血管血流动态追踪观测。
试剂配制后可直接用于活体血管灌注标记,稀释后经外周循环给药,1 分钟内即可完成全身微血管内皮特异性结合,荧光信号稳定留存 60 分钟以上,能够完整捕捉微血管分支、血管吻合支、毛细血管窦的三维空间分布,用于解析组织微循环网络拓扑结构。体外细胞层面,可用于原代内皮细胞体外培养鉴定,区分纯化内皮细胞与杂细胞群体,观测内皮细胞成管实验中新生管状结构的糖基表达特征。
该探针在组织切片三维重构实验中优势突出,橙红色荧光信号边界清晰,可通过图像软件完成微血管管径、血管密度、分支点数量量化统计,实现微循环形态学数据数字化分析。与游离 AF 546 染料相比,LEL 载体赋予探针细胞靶向性,大幅降低游离染料造成的非特异性背景荧光,省去封闭液额外优化步骤。储存采用低浓度叠氮钠防腐缓冲体系,4℃短期存放可维持两周活性,分装冻存可长期稳定保存,是微循环、血管发育基础研究领域标准化荧光标记试剂。

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