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AF 532 CTB,中文名称 AF 532 标记的霍乱毒素 B 亚基,配套英文名称 AF532 Cholera Toxin B、AF532 rCTB、CTB-AF532 Conjugate,是基于无毒重组霍乱毒素 B 五聚体蛋白与 Alexa Fluor 532 荧光基团偶联而成的细胞膜脂筏特异性探针,核心靶向细胞膜表面 GM1 神经节苷脂糖脂结构,专注细胞膜微区、胞吞转运、神经元通路基础示踪研究,无细胞毒性,仅用于体外科研成像。
CTB 天然为同源五聚体蛋白,五个单体各自携带独立 GM1 神经节苷脂结合位点,与靶标糖脂结合亲和力达 10¹⁰ M⁻¹,且完整去除毒素催化亚基,不存在细胞损伤、信号扰动等副作用,活细胞孵育数小时仍可维持细胞生理活性。偶联 Alexa Fluor 532 荧光基团后,光谱参数稳定在激发 532nm、发射 554nm,黄绿色荧光波段独立于橙红、蓝色荧光通道,多标记实验中无光谱交叉干扰,荧光量子产率高,弱表达 GM1 的细胞群体也可检出清晰信号。
该探针核心靶向位点 GM1 神经节苷脂是细胞膜脂筏微区标志性糖脂,脂筏参与细胞信号分子富集、膜蛋白侧向转运、胞吞囊泡形成等基础生命过程,AF 532 CTB 可原位标记活细胞膜脂筏,实时观测脂筏在细胞迁移、受体聚集过程中的动态分布变化。实验操作适配活细胞孵育与固定切片两种体系,活细胞染色仅需室温 30 分钟孵育,无需细胞膜通透剂,仅结合细胞外膜表面 GM1;甲醛固定切片染色可穿透薄层组织,标记神经元细胞膜表面糖脂,用于神经细胞轴突、树突通路逆行示踪,绘制细胞间连接网络图谱。
在胞吞动力学观测实验中,AF 532 CTB 结合膜表面 GM1 后随脂筏内吞进入胞内囊泡,借助荧光成像可追踪囊泡从细胞膜到溶酶体、高尔基体的转运全过程,量化内吞速率与囊泡尺寸分布。试剂水溶性优异,可直接溶于细胞完全培养基,无有机溶剂残留毒性,批次间偶联比例统一,成像数据重复性稳定。储存条件为 - 20℃避光冻干保存,避免反复冻融破坏 CTB 五聚体空间结构,是细胞膜微区、神经细胞示踪、膜转运机制研究不可或缺的荧光检测探针。

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