CY5 NHS Ester（Cyanine5 SE，即花氰染料CY5-活性酯，CAS 146368-14-1）是CY5染料家族中应用最广泛的氨基特异性标记衍生物，由CY5母核的羧酸基团与N-羟基琥珀酰亚胺发生酯化反应制备得到，是生物分子荧光标记实验中最常用的近红外荧光试剂之一。该化合物的激发波长为649 nm，发射波长为670 nm，在近红外区域的荧光信号穿透性强，可有效穿透厚度数毫米的透明凝胶材料，在凝胶成像场景中可获得远高于可见光染料的信噪比。 

该活性酯基团在pH 7.0-9.0的弱碱性缓冲体系中可与伯氨基发生高效的亲核取代反应，形成稳定的酰胺键，标记反应的转化率可达90%以上，且反应条件十分温和，在室温下避光孵育30分钟即可完成标记，不会破坏蛋白质、多肽等生物大分子的空间构象与原有生物活性。该化合物易溶于无水DMSO、无水DMF等干燥极性有机溶剂，溶解后可长期在-20℃避光条件下储存，仅在水相环境中会缓慢发生水解，因此实验操作中现配现用即可获得*高的标记效率。 

在非医疗应用场景中，该染料是二维凝胶电泳后蛋白质荧光染色的常用试剂，通过特异性标记蛋白质侧链的氨基位点，可在近红外成像系统下获得背景*低的蛋白质分离图谱，大幅提升低丰度蛋白质的检测限；它也被用于荧光标记多肽固相合成，在多肽链合成完成后将CY5荧光基团定点接入多肽末端，制备带有近红外示踪信号的多肽探针，用于多肽在材料表面吸附行为的表征研究；同时它还是制备荧光标记亲和层析介质的关键试剂，将其共价偶联在层析介质表面的氨基位点上，可用于实时监测层析过程中目标分子的结合与洗脱过程，为分离纯化工艺的参数优化提供直观的可视化依据。 

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