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CY5-NHS Ester(Cyanine5 Activated Ester,即花氰染料CY5-活化酯,CAS 1263093-76-0)是经过结构优化的CY5活性酯衍生物,在吲哚环母核上引入了额外的磺酸根修饰基团,大幅提升了化合物的水相溶解度,是专门为水相标记场景开发的近红外荧光标记试剂。该化合物的*大激发波长为640 nm,*大发射波长为664 nm,在水相体系中无需添加任何有机溶剂即可完全溶解,避免了部分对有机溶剂敏感的生物分子在标记过程中发生变性失活。
经过磺酸根修饰后的活化酯分子,在水相环境中的稳定性大幅提升,在pH 7.4的PBS缓冲液中半衰期可达数小时,远高于非磺化的普通CY5活性酯,让研究人员有更充足的时间完成标记反应的操作与后续纯化步骤。该化合物的氨基标记特异性*强,几乎不会与羟基、巯基等其他活性基团发生副反应,标记产物的荧光量子产率可达0.2,在水相环境中长时间放置也不会出现明显的荧光淬灭现象。
在非医疗应用场景中,该染料是活细胞表面蛋白荧光标记的理想试剂,直接将其加入无有机溶剂的细胞悬浮液中,即可特异性标记细胞表面暴露的氨基位点,在不损伤细胞活性的前提下实现活细胞的长时间近红外荧光示踪;它也被用于环境中游离氨基酸的荧光衍生化,在水相体系中直接与氨基酸的氨基位点结合,衍生后的产物可通过高效液相色谱进行高灵敏度荧光检测,大幅提升水体中痕量氨基酸的定量检测限;同时它还是荧光标记多糖的首选试剂,在完全水相的反应体系中对多糖分子上的氨基位点进行标记,制备得到的荧光示踪多糖可用于研究多糖在土壤介质中的吸附与迁移规律,为土壤碳循环相关研究提供关键的技术支撑。

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