BTQ‑2 Amidite，BTQ‑2 猝灭剂亚磷酰胺，英文别名 BTQ‑2 Phosphoramidite、BTQ‑2 DMT‑Amidite、BTQ‑2 Quencher Phosphoramidite，是面向全自动固相核酸合成开发的非荧光淬灭功能亚磷酰胺单体，适配标准 DNA 合成仪整套循环工艺，用于在寡核苷酸链 5’端或者序列内部定点引入 BTQ‑2 暗淬灭基团。试剂带有 DMT 二甲氧基三苯甲基保护基团，3’位为亚磷酰胺活性位点，常规为深紫色固体，溶于无水乙腈，储存需要隔绝水汽，低温避光保存，防止磷酰胺水解失活。

BTQ‑2 属于暗淬灭基团，自身几乎不产生荧光发射，*大吸收区间覆盖 560‑670nm 光谱范围，可以高效淬灭该波段发射的各类荧光染料，包含 HEX、TAMRA、Cy3、Cy3.5 等常见荧光团，依托福斯特共振能量转移 FRET 机制消耗荧光激发能量，降低背景荧光信号，提升核酸探针检测信噪比。区别于传统荧光染料充当淬灭基团，暗淬灭剂不会产生残余荧光泄露，减少检测通道串扰，对于多重荧光检测体系增益明显。

该亚磷酰胺单体完全兼容商用固相寡核苷酸合成流程，四唑类活化剂即可完成偶联，合成中氧化、脱三苯甲基、氨解脱保护等整套步骤条件，和普通脱氧核苷亚磷酰胺保持一致，无需修改合成程序。合成结束氨解处理之后，BTQ‑2 淬灭基团能够稳定保留在核酸链之上，不会被浓氨水降解破坏。该试剂既可以修饰探针 5’末端，也可以插入寡核苷酸序列中间位置，灵活调控淬灭基团与荧光基团之间的碱基距离，以此调控 FRET 效率，构建分子信标、双标记水解探针等各类核酸探针原件。

在探针研发工作当中，BTQ‑2 Amidite 用来制备 qPCR 水解探针、分子信标、核酸传感器探针。通过调整淬灭基团插入位置，优化荧光‑淬灭基团空间距离，以此优化探针关闭状态下的背景压制效果。实验上必须严格保证试剂无水环境，亚磷酰胺遇水快速分解失效；配置乙腈母液需要使用无水级溶剂；合成完成的修饰寡核苷酸，需要避光保存，避免偶氮类淬灭发色团光降解。该类功能亚磷酰胺，是核酸化学当中实现探针信号调控的核心构筑砌块。

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