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BTQ‑1 dT Linker Amidite,BTQ‑1 dT‑Linker Phosphoramidite,BTQ‑1 dT 连接臂亚磷酰胺
BTQ‑1 dT Linker Amidite,BTQ‑1 脱氧胸苷连接臂亚磷酰胺,英文别名 BTQ‑1 dT‑Linker Phosphoramidite、BTQ‑1 Quencher dT Amidite、BTQ‑1‑dT‑Phosphoramidite,是一类以脱氧胸苷 dT 为母核骨架的淬灭修饰亚磷酰胺,用于固相寡核苷酸合成,将 BTQ‑1 暗淬灭基团借助柔性连接臂整合进入核酸链内部序列当中,分子量 1401.54,适配标准 DNA 合成工艺条件。分子具备 DMT 保护基团,3’‑OH 被转化为亚磷酰胺活性结构,整体为深色固体,可溶于无水乙腈,需要严格无水避光低温储存,规避水解与光致发色团降解。
和普通 BTQ‑1 Amidite 有所区别,该试剂自带完整脱氧胸苷核苷骨架,不是单纯末端标记修饰;当它参与固相合成,会像普通 dT 核苷一样,真正共价整合进核酸磷酸二酯主链,碱基位置通过柔性长连接臂向外挂载 BTQ‑1 淬灭发色团。柔性 linker 可以提供充足活动自由度,削弱核酸双链空间刚性带来的位阻,让 BTQ‑1 淬灭基团可以自由靠近配对的荧光基团,保障 FRET 能量转移效率,不会被核酸双螺旋结构束缚住空间位置。BTQ‑1 淬灭基团吸收光谱覆盖 480‑580nm,适配 FAM、JOE 等短波长荧光染料淬灭。
该试剂*大应用特点是支持淬灭基团在核酸序列内部任意位点嵌入,而不局限于 5’或者 3’末端标记。很多探针设计场景,需要淬灭基团放置在序列中间,而不是两端;普通末端亚磷酰胺无法实现该需求,BTQ‑1 dT Linker Amidite 就可以替代序列当中某一个 dT 碱基,直接把淬灭单元植入链中间。核苷骨架保障核酸链整体杂交能力,不会大幅度破坏寡核苷酸和互补靶序列之间的双链结合热力学稳定性,这一点对于分子信标、茎环探针的设计尤为关键。
合成实操层面,该试剂偶联效率略低于普通天然核苷亚磷酰胺,合成时可以适度延长偶联时间,保障修饰位点的连接效率。整套氨解脱保护条件和普通 DNA 合成保持一致,浓氨水处理不会破坏 dT 骨架、连接臂以及 BTQ‑1 淬灭发色团。修饰完成的寡核苷酸产物要全程避光储存,减少偶氮发色团光分解。该类核苷型淬灭亚磷酰胺拓展了核酸探针的设计自由度,方便研发人员开发非末端标记的新型荧光核酸传感原件。

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