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Biotin-Cephaeline,中文名称生物素-吐根酚碱,英文别名包括Biotinylated Cephaeline、Biotin-Ceph、Cephaeline-Biotin Conjugate,是将生物素单元通过温和的共价修饰连接在吐根酚碱母核活性位点之外的天然衍生物探针。该分子完整保留了吐根酚碱的特征性异喹啉生物碱母核结构,可维持与天然吐根酚碱高度相似的分子识别特性,是体外天然产物靶标垂钓研究的核心工具。
在基于亲和垂钓的靶标鉴定实验中,Biotin-Cephaeline可直接作为诱饵分子固定在链霉亲和素修饰的固相载体上,从细胞全蛋白裂解液中特异性捕获与吐根酚碱存在相互作用的靶标蛋白。相较于传统的环氧活化树脂固定方法,借助生物素-链霉亲和素体系的固定过程更温和,能*大程度保留诱饵分子的空间构象,大幅降低非特异性吸附的背景噪音,显著提升后续质谱鉴定结果的可靠性。
在小分子-蛋白互作的结构生物学研究中,该探针还可用于互作位点的验证实验,通过在吐根酚碱分子上引入的生物素标签,科研人员可利用蛋白免疫印迹技术,直接验证候选靶标蛋白与吐根酚碱的结合活性,快速排除假阳性结果。在体外模拟实验中,使用该探针完成的亲和垂钓实验,得到的特异性互作蛋白数量较传统直接固定方法提升了近一倍,为天然产物作用机制的解析提供了大量新的候选方向。
该化合物常规储存条件为-20℃密封避光保存,可溶于DMSO、甲醇等有机溶剂,中性水相缓冲液中也可保持数天稳定,适配各类体外分子互作实验场景。

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