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Biotin-C2-S-S-pyridine,中文名称生物素-C2-二硫键-吡啶,英文别名包括Biotin-SS-Pyridine、Biotin Disulfide Pyridyl Disulfide、Pyridyldithioethyl Biotin,是一款带有反应性吡啶二硫端基的可断裂型生物素连接试剂。该化合物CAS号为112247-65-1,分子结构中同时包含生物素识别单元、可还原二硫键与吡啶二硫反应基团,可与靶标分子上的游离巯基发生高效的特异性偶联,同时在后续还原环境下实现生物素标签的可控断裂与释放。
在可逆性生物素标记实验中,该试剂可在温和的中性pH条件下与蛋白、多肽表面的游离巯基发生反应,将生物素标签定点引入靶标分子,反应过程中生成的吡啶-2-硫酮副产物可通过简单的透析或凝胶过滤步骤完全去除,不会对靶标分子的活性产生影响。相较于普通的不可逆生物素标记试剂,该探针引入的二硫键可在低浓度的二硫苏糖醇或谷胱甘肽环境下快速断裂,实现生物素标签的完全脱除,完美解决了传统生物素标记后标签难以去除、影响后续下游实验的痛点。
在基于生物素富集的蛋白组学样品前处理流程中,使用该试剂对靶标蛋白进行标记与富集后,无需使用剧烈的变性条件洗脱蛋白,仅需加入适量的还原试剂,就能将完整的靶标蛋白从链霉亲和素树脂上温和洗脱下来,*大程度保留蛋白的天然构象与活性,为后续的蛋白功能分析提供了完整的活性样本。实验数据显示,使用该方法洗脱得到的蛋白活性保留率是传统热变性洗脱方法的3倍以上。
该化合物外观为类白色固体,常规储存条件为2-8℃密封干燥避光保存,需避免与强还原性物质共同存放,其在DMSO中的稳定性优异,配置成母液后可长期储存。

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