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BG‑PEG4‑Amine(BG‑PEG4‑NH2,Benzylguanine‑PEG4‑Amine,NH2‑PEG4‑Benzylguanine),中文名称为苄基鸟嘌呤‑四聚乙二醇‑氨基,分子式C₂₄H₃₅N₇O₆,分子量517.59,是一款短链PEG型双官能团SNAP‑tag底物,固体形态,‑20℃避光密封储存,HPLC纯度可达95%以上,适合需要紧凑连接臂的生物分子偶联体系。分子由苄基鸟嘌呤识别单元、四乙二醇间隔链、末端游离伯氨基组成,短PEG4链带来紧凑分子构型,区别于长链PEG8衍生物,在空间受限的分子组装体系中具备独特优势。
BG基团维持对SNAP‑tag融合蛋白的专一识别能力,生理pH条件下快速发生自杀式转烷基反应,形成不可逆共价硫醚键,将整个分子牢牢挂载在目标蛋白上,实现位点特异性标记,不会随机修饰蛋白其他氨基酸残基,*大程度保留目标蛋白原有生物活性,适合膜蛋白、细胞器蛋白等结构敏感蛋白的标记研究。PEG4链提供适度亲水属性,改善试剂水相溶解表现,同时保持较短分子跨度,适合蛋白局部环境空间狭小,长PEG链容易发生缠绕干扰的实验场景。短间隔臂会让末端氨基距离蛋白表面更近,在固相点固定、小分子配体偶联场景下,能够实现更加紧凑的分子排布。
末端伯氨基拥有丰富化学反应兼容性,借助EDC/NHS活化体系,可与含羧基的染料、多肽、小分子配体完成偶联;也可以直接和商品化NHS酯探针反应完成二次功能化。该试剂非常适配脉冲追踪(Pulse‑chase)蛋白代谢实验,先利用BG‑PEG4‑Amine标记细胞内已经合成完成的SNAP‑tag融合蛋白,再加入游离无标记BG底物封闭剩余SNAP‑tag位点,阻断新合成蛋白标记,后续通过氨基偶联不同报告分子,区分新旧蛋白群体,追踪蛋白降解、转运周转动态变化,是蛋白生命周期研究的重要工具试剂。
除脉冲示踪之外,该试剂也可用于超分辨显微探针前体制备,将BDP系列、硅罗丹明等超分辨染料偶联至氨基端,制备SNAP‑tag定点标记探针,用于STED、单分子定位成像;还可用于蛋白‑多肽杂合分子构建,实现多肽配体与SNAP‑tag蛋白定点共价连接。需要留意,相比长链PEG衍生物,PEG4短链的水溶性略弱,高浓度条件下容易出现析出,配置储备液时可少量加入DMSO助溶;同时氨基容易发生氧化降解,储存环境需要保持干燥惰性氛围,避免氨基失活影响后续偶联效率。

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