RGDfk‑PEG‑NHS 环肽cRGDfk‑聚乙二醇‑N‑羟基琥珀酰亚胺活性酯，补充别名cRGDfK‑PEG‑NHS、Cyclo‑RGDfk‑PEG‑Succinimidyl ester、cRGD‑PEG‑SE，是将环化RGDfk多肽通过聚乙二醇连接臂修饰NHS琥珀酰亚胺活性酯得到的多肽‑PEG活性偶联试剂。线性RGD多肽构象自由度高，结合特异性有限；环化之后的cRGDfk形成刚性环状结构，多肽构象被固定，识别结合能力显著提升。末端NHS活性酯可以和伯氨基发生高效酰胺化反应，能够共价偶联带有氨基的蛋白、多糖、氨基化固相载体，实现环RGD多肽定向固定，PEG链段可以减少空间位阻，维持环肽的环状构象不被接枝过程破坏。

合成路线主流采用先环化后偶联策略，固相合成得到线性RGDfk多肽之后，溶液内完成分子内环化得到环肽；再和双端官能化PEG发生偶联，PEG另一端转化生成NHS活性酯；产物经过制备色谱纯化，除去未环化线性多肽、水解活性酯杂质，获得高纯度偶联产物。该产物易溶于无水二甲基亚砜、二甲基甲酰胺，在水相缓冲液当中NHS基团会发生水解，水溶液环境半衰期较短。固体样品需要‑20℃低温干燥密封保存，接触湿气会造成活性酯水解失活。

该试剂核心用途为体外共价修饰，针对带有氨基的大分子与固相载体引入环RGD识别单元。可对氨基修饰微球、氨基化水凝胶、多糖衍生物、蛋白分子进行标记，将环状多肽共价固定到材料表面。通过调控投料摩尔比，可以精准控制多肽接枝密度，避免多肽过量接枝造成空间拥挤，丧失识别活性。借助荧光标记竞争结合实验、表面等离子体共振，评价不同接枝密度条件下环肽与靶标蛋白的结合能力，探究多肽空间排布对分子识别亲和力的影响规律。也可以用于构建多肽修饰蛋白探针，用于体外蛋白‑多肽相互作用体系的定量表征。

反应体系需要规避大量伯胺杂质，缓冲体系优先选用无氨基的碳酸氢盐缓冲，不能使用Tris类缓冲试剂，否则游离氨基会消耗NHS活性基团。水相反应需要缩短孵育时间，减少活性酯水解损耗；接枝完成之后，需要使用甘氨酸淬灭体系内残余活性酯，消除非特异性结合干扰。该试剂用于体外生化偶联、生物界面构建相关基础研究。

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