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Cy5.5-TCO,中文名称为花青素Cy5.5-反式环辛烯,别名Cyanine5.5-TCO、Sulfo-free Cy5.5-trans-Cyclooctene、Cy5.5 trans-Cyclooctene conjugate,是将长波长花青素荧光基团与反式环辛烯反应基团共价结合的近红外功能探针。该探针的荧光发射波长处于近红外远红区,能够有效避开常规生物样品中自发荧光的主要波段,大幅降低样品本底带来的背景干扰,获得信噪比更高的荧光信号。
传统的可见光区荧光探针在复杂样品体系中进行成像时,很容易受到样品中杂质自发荧光的干扰,导致有效信号被背景掩盖,难以实现低浓度目标物的清晰检测。而Cy5.5-TCO的激发波长约675nm,发射波长约695nm,处于生物组织自发荧光*低的光学窗口,即使在成分复杂的样品体系中,也能获得清晰可辨的荧光信号,无需复杂的背景扣除处理就能得到高质量的成像结果。同时该探针的分子结构经过优化,在保持近红外荧光特性的同时,兼顾了在常规有机溶剂中的溶解性,实验配制过程更加便捷。
该探针依托TCO与四嗪的生物正交反应实现特异性标记,反应条件温和,不需要额外添加催化剂,不会对荧光基团的共轭结构造成破坏,标记完成后的产物荧光性能稳定,不易出现光漂白现象。在材料界面标记实验中,科研人员可以先对材料表面进行四嗪功能化修饰,再加入低浓度的Cy5.5-TCO进行特异性偶联,就能在材料表面形成均匀的近红外荧光标记层,通过近红外成像设备可以清晰观测材料表面的修饰均匀度,检测常规可见光荧光难以识别的微区缺陷。
相比于水溶性磺化修饰的近红外探针,非磺化的Cy5.5-TCO拥有更均衡的溶解性能,既可以在*性有机溶剂中充分溶解,也能通过少量助溶剂的辅助在水相体系中均匀分散,适配更多不同类型的实验体系。在多色标记实验中,该探针的长波长荧光信号可以和绿光、红光波段的其他探针实现完美的光谱区分,不会出现光谱串色问题,能够支持三个及以上通道的同时成像,为多组分并行观测提供可靠的近红外信号支撑。

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