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AF488 Cadaverine,中文名称AF488尸胺,也可称为Alexa Fluor 488 Cadaverine、AF488戊二胺、Alexa Fluor 488戊二胺,是将Alexa Fluor 488荧光团与尸胺的脂肪族二胺结构共价结合形成的双功能荧光探针。它的核心结构一端是高亮度的磺化荧光母核,另一端是带有伯氨基的五碳脂肪链,这种设计让它同时具备优异的光学性能和特异性偶联能力,完全区别于普通的氨基荧光染料。
从光物理特性来看,AF488 Cadaverine的*大激发波长约为495 nm,发射峰值在519 nm,与常规FITC的光谱窗口高度适配,但它的抗光漂白能力远高于传统荧光素,在长时间激光扫描或连续观测场景下,荧光信号衰减速度仅为FITC的三分之一左右。同时它的荧光信号在pH 4到10的宽范围内几乎不受影响,不会因为缓冲体系的轻微pH波动出现亮度骤降,这让它在复杂的生化反应体系中表现出*强的稳定性。
它*核心的应用场景是作为转谷氨酰胺酶的底物探针,在酶的催化作用下,探针上的伯氨基可以精准靶向结合到蛋白质表面的谷氨酰胺残基侧链上,实现位点特异性的荧光标记。这种标记方式不会破坏蛋白的整体空间构象,也不会引入额外的大位阻修饰,非常适合用于研究蛋白质的谷氨酰胺残基修饰位点分布,以及细胞外基质中交联蛋白的动态组装过程。除此之外,它还可以用于醛基修饰材料的荧光示踪,比如经过高碘酸氧化处理的多糖、氧化石墨烯表面的醛基位点,都能和它的氨基发生特异性结合,从而可视化材料表面的活性位点分布密度。
在合成与纯化层面,AF488 Cadaverine通常采用两步缩合工艺制备:先将Alexa Fluor 488的活性酯基团与Boc保护的尸胺在弱碱性无水体系中反应,再通过三氟乙酸脱除氨基保护基,最终经反相色谱纯化得到纯度95%以上的产物。操作使用时,建议将其母液用无水DMSO配制成10 mM浓度,避光分装后置于-20℃环境储存,避免反复冻融导致的氨基氧化失活。实验过程中要避免体系内存在大量游离氨基杂质,否则会竞争性消耗探针,降低标记效率。

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