AF488 Concanavalin A，植物血凝素标记荧光染料AF488，英文别名Alexa Fluor488 Con A、AF488‑ConA、Alexa Fluor 488‑Concanavalin A，中文名称AF488标记刀豆球蛋白A，是将Alexa Fluor488绿色荧光染料与刀豆球蛋白A（Concanavalin A，Con A）凝集素蛋白共价偶联制备而成的荧光探针，属于荧光标记植物凝集素，保留蛋白本身碳水化合物识别能力，同时携带明亮稳定绿色荧光信号。刀豆球蛋白A来源于刀豆，中性pH条件下以四聚体形式存在，分子量约104 kDa，每个亚基都具备糖结合位点，特异性识别α‑D‑吡喃甘露糖残基、α‑D‑吡喃葡萄糖残基，这类糖基广泛分布于哺乳动物细胞膜糖蛋白、糖脂、酵母真菌细胞壁糖链之上；pH低于5.0环境蛋白解离为二聚体，糖结合活性会发生改变，因此染色缓冲液需要维持中性pH区间。偶联过程一般通过AF488活性酯与ConA蛋白表面赖氨酸氨基反应，反应条件温和，*大程度保留凝集素糖识别活性，偶联完成去除游离染料，得到成品荧光凝集素复合物。

该探针激发495 nm，发射519 nm，适合488 nm激光通道，可用于活细胞染色，也可用于经过固定透化的细胞、组织切片样本。活细胞染色时，探针结合细胞膜外侧糖蛋白糖链，主要标记细胞膜轮廓；样本经过透化处理之后，探针可以进入胞内，标记内质网、高尔基体等分泌通路细胞器内部糖蛋白，用于观测分泌通路细胞器形态分布，也可用于细菌生物膜、真菌细胞壁染色，观察微生物表层糖链结构。流式细胞检测场景中，该探针可以快速标记细胞表面甘露糖、葡萄糖型糖链，通过荧光强度变化，统计细胞群体糖基化水平差异，对比不同处理条件细胞糖基化表型变化。

实验操作层面，染色缓冲液建议添加钙离子、锰离子，二价金属离子是ConA糖结合位点发挥功能的必需辅因子，缺失二价阳离子会直接造成凝集素丧失糖结合能力，染色完全失效。甘露糖、葡萄糖游离单糖可以竞争性抑制探针与细胞糖链结合，可以设置单糖竞争对照组，用来区分特异性信号和非特异性吸附背景，这是凝集素实验重要对照手段。孵育完成后PBS充分洗涤，去除未结合探针，可搭配DAPI、红色荧光抗体开展多色成像，实现糖链与胞内蛋白、细胞核共定位分析。该探针可用于凝胶内糖蛋白荧光染色，电泳凝胶孵育AF488‑ConA，直接显示凝胶中带有甘露糖、葡萄糖残基的糖蛋白条带，不需要复杂的蛋白印迹转膜操作。作为经典荧光凝集素工具，AF488‑Concanavalin A为细胞膜糖基化、细胞器糖蛋白、微生物糖被相关研究提供直观可视化手段，是糖生物学成像体系中不可或缺的探针。

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