FAM hydrazide, 6-isomer，中文名称6-羧基荧光素酰肼，CAS编号2183440-65-3，属于6位异构体的荧光素酰肼类荧光探针，将荧光素母核与酰肼活性基团结合，是专门针对羰基基团进行化学标记的小分子荧光染料，在微量羰基化合物检测、材料表面羰基位点示踪、高分子界面化学表征领域拥有广泛应用潜力。区别于普通氨基修饰荧光染料，酰肼基团可以在温和弱酸环境下，特异性与醛基、酮基发生缩合反应生成稳定腙键，实现对含羰基底物的共价荧光标记，不会和常规羧基、羟基基团发生非特异性偶联，标记选择性突出。

该染料的荧光母核为6-羧基荧光素，具有典型的绿色荧光特征，*大激发波长约494 nm，*大发射波长约518 nm，荧光量子产率高，在中性至弱碱性环境下发光信号稳定，在常规有机相与水相混合体系均可完成标记反应。6位异构体的取代位置决定其光谱特性与5位FAM酰肼存在细微差异，两者荧光峰位基本接近，但分子偶极矩不同，在极性环境、高分子基质内的荧光淬灭行为、偏振荧光响应存在区别，在需要区分两种异构体信号的多通道标记实验中，是重要的配套探针。酰肼官能团的反应窗口具备pH依赖性，*优反应区间一般在pH 4–6的弱酸性缓冲环境，过高pH会降低缩合反应速率，强酸性条件则容易造成腙键水解，破坏标记产物。

在材料化学表征场景中，该探针常用来定量检测高分子材料、纳米颗粒表面的醛基位点。很多经过氧化处理的多糖、碳基纳米材料、聚合物薄膜，氧化后会在表面生成醛羰基，使用FAM hydrazide,6-isomer进行标记后，借助荧光强度可以反推材料表面羰基的密度，实现界面官能团的半定量表征。同时也可用于溶液中小分子醛酮类物质的荧光示踪，用于研究氧化降解过程中羰基副产物的生成规律，追踪高分子材料老化氧化进程。

该试剂的纯化多依靠高效液相色谱，产物纯度可以通过紫外吸收与质谱联合验证。固体形态为橙红色粉末，储存条件为-20℃避光干燥保存，需要隔绝水汽，防止酰肼基团缓慢水解失活。溶剂选择上，该染料可溶于DMSO、DMF，在纯水中溶解度有限，标记实验通常采用有机溶剂与缓冲液的混合体系。该探针不依赖点击化学反应，依靠腙键特异性标记羰基，与炔基、叠氮类荧光标记试剂形成功能互补，丰富材料界面的荧光表征手段。科研人员可借助该染料结合荧光光谱、共聚焦荧光成像，直观观测材料表面官能团分布，为高分子氧化改性、表面官能化工艺优化提供表征依据。

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