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甲基丙烯酰化/苯硼酸双修饰明胶是以天然明胶蛋白分子为骨架,通过可控改性同时引入甲基丙烯酰双键与苯硼酸功能单元得到的双功能蛋白基衍生物,产物外观为淡黄色的冻干絮状粉末,在37℃以上的温水中可快速溶解形成均一的透明溶液,保留了明胶蛋白特有的温度响应溶胶-凝胶转变特性。
该分子的合成工艺全程在温和水相条件下进行:首先在40℃的中性缓冲体系中,让明胶分子侧链上的赖氨酸氨基与甲基丙烯酸酐发生酰胺化反应,将甲基丙烯酰基团接枝到蛋白分子链上,通过调整酸酐的投料比精准控制双键的接枝率;随后利用碳二亚胺类活化剂,将羧基苯硼酸与明胶分子侧链上的天冬氨酸、谷氨酸残基的羧基位点发生选择性偶联,在不破坏原有双键结构的前提下,将苯硼酸单元引入蛋白分子,最终得到的产物保留了明胶蛋白的天然温度响应属性。
在双网络水凝胶的成型加工中,该材料展现出多机制协同的优势。该材料的37℃水溶液温度降低到室温区间时,明胶蛋白链可通过自身的氢键作用发生物理缠绕,形成第一层物理凝胶网络,快速固定材料的初步形状;随后体系中添加的含多顺式二醇的组分可与苯硼酸单元发生动态硼酸酯结合,形成第二层动态共价交联网络;最后通过紫外光照射触发甲基丙烯酰双键发生自由基聚合,形成第三层永久共价交联网络。三步成型过程条件温和,无需高温或有毒试剂参与,最终得到的复合凝胶同时具备优异的弹性、抗撕裂性能与动态响应特性,性能远优于单一改性的明胶基凝胶。
在蛋白基3D打印的应用场景中,该材料是性能优异的打印墨水组分。依靠明胶本身的温度响应特性,打印过程中可通过低温快速定型,保证打印结构的高精度;动态硼酸酯网络赋予打印墨水优异的剪切变稀与自修复特性,大幅降低打印过程中的挤出阻力,同时避免挤出后的结构发生坍塌;后续的光交联步骤可进一步提升最终打印结构的长期稳定性,解决传统明胶基打印结构力学性能弱、易变形的问题。
该材料需在4℃以下的低温干燥环境中密封储存,避免长期处于高于室温的环境中,防止明胶蛋白发生缓慢的变性失活。操作过程中需避免体系长时间处于温度高于60℃的环境,否则会破坏明胶蛋白的天然空间构象,导致其温度响应特性完全丧失。

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