胶质瘤是一种恶性原发性脑**疾病，由于耐药性和血脑屏障 (BBB) 和血**屏障 (BTB) 等影响使得治疗非常困难。为了克服这些障碍，有科研团队尝试设计了T7和DA7R双肽修饰的脂质体（缩写为 T7/DA7R-LS），有效地将阿霉素 (DOX) 和长春新碱 (VCR) 共同递送至胶质瘤细胞中。

文献简述

神经胶质瘤临床管理的一个主要障碍是存在血脑屏障 (BBB)，传统的纳米载体可以提高渗透性和滞留（EPR）效应并跨越生理障碍。然而，缺乏特异性靶向，效果不佳。

近年来，主动靶向给药系统已经证明了改善胶质瘤治疗结果的潜力。其中噬菌体是一种独特的靶向剂T7 (HAIYPRH)，它以高亲和力和特异性与转铁蛋白受体 (TfR) 结合。TfR在脑内皮细胞和脑胶质瘤细胞中均过表达，据此T7 肽广泛被用作靶向药物递送系统中的配体，用于BBB穿透和神经胶质瘤治疗。

另一个屏障是血**屏障（BTB），它限制了药物在**中的积累，有研究发现血管内皮生长因子受体2 (VEGFR 2) 在脑胶质瘤细胞中高度表达，因此，VEGFR 2成为胶质瘤靶向给药的理想靶点。d-肽DA7R对 VEGFR 2具有高亲和力。最近，据报道DA7R修饰的脂质体可以通过穿过BTB并靶向有效抑制胶质瘤生长胶质瘤细胞。

此外，单一药物疗法用于治疗癌症效果甚微，联合疗法可以克服耐药性更加有效。有研究表明称阿霉素（DOX）和长春花生物碱长春新碱（VCR）是常用的抗**药物。临床实践其会受到心脏毒性和耐药性的阻碍。

据此可将DOX和VCR作用于**细胞的不同靶点。它们的组合不仅可以有效地克服耐药性，而且还可以降低心脏毒性。对于DOX 和 VCR 的协同作用，它们的优化剂量比被测量为 4:1。

这里假设通过使用双靶向（T7 和DA7R 肽）和联合治疗（DOX和VCR）策略来克服多种生理障碍（BBB 和 BTB）和耐药性，可以实现全身性胶质瘤靶向给药。

T7和DA7R 在含有 DOX 和 VCR的 PEG 化脂质体（缩写为 T7/DA7R-LS）的表面上进行了修饰。

靶向分子偶联物的合成和表征

通过将DSPE-PEG 2000 -Mal分别与 T7 和D A7R上的半胱氨酸残基缀合来合成DSPE-PEG 2000-T7和DSPE-PEG2000-DA7R 。T7和DA7R在室温下与含有三乙胺(TEA，5当量)的氯仿中的DSPE-PEG 2000 -Mal(1:1摩尔比)结合，同时搅拌24小时。

将反应混合物在蒸馏水中透析 (截留分子量 (MWCO) 3.5 kDa) 48 小时以去除氯仿和未反应的肽。通过旋转蒸发将最终溶液蒸发并储存在-20°C直至进一步使用。

脂质体的制备

通过脂质膜的直接水合制备具有HSPC:Chol: DSPE-PEG2000(mol/mol, 50:43:7)组成的未修饰脂质体 (N-LS) 稍作修改。

将所有脂质或疏水性探针 (Cy5.5) 用氯仿-甲醇 (3:1, v/v) 溶解在梨形烧瓶中，随后在真空下使用旋转蒸发仪蒸发形成干膜。然后使用 300 mM 柠檬酸缓冲溶液在 50 °C 下将脂质膜水合 30 分钟。为了控制尺寸，使用小型挤出机（Avanti，Canada）将脂质分散体通过 100 nm 聚碳酸酯过滤器挤出 11 次。

T7 修饰的脂质体 (T7-LS) 和D A7R 修饰的脂质体 ( DA7R-LS) 按照相同的程序制备，除了 DSPE-PEG 2000被 DSPE-PEG 2000 -T7 和 DSPE-PEG 2000 - D A7R 缀合物部分取代。

DOX 和 VCR (4:1, w/w) 使用 pH 梯度法以 1:20 的药物/脂质质量比加载到各种脂质体制剂中，将上述制备的空白脂质体悬液直接加入300 mM柠檬酸缓冲溶液中，加入DOX和VCR中，分别得到2.0和0.5 mg/mL的药物浓度；

然后使用 100 mM Na 2 CO 3溶液将外相的 pH 值调节至 7.5 ，并在 55°C 下孵育约 30 分钟。最后，载药脂质体通过 100 nm 聚碳酸酯过滤器过滤灭菌，并分装到无菌小瓶中（DOX 1.6 mg/mL，VCR 0.4 mg/mL）。

此外，在C6**小鼠模型上评估了脂质体的体内靶向效率、协同**抑制作用。

结论

综上科研学者成功研发了T7和DA7R修饰的双配体脂质体T7/DA7R-LS用以递送阿霉素 (DOX) 和长春新碱 (VCR)到**部位。该系统可以穿透BBB和BTB。基于T7/ D A7R-LS的胶质瘤靶向能力，充分利用了DOX和VCR在胶质瘤抑制中的协同作用，并限制了它们的毒性。是一种理想且有效的治疗胶质瘤的靶向肽纳米疗法。

本文涉及的科研材料

DSPE-PEG 磷脂-聚乙二醇

http://www.xarxbio.com/pro/pro-3524.html

DSPE-mPEG 磷脂-甲氧基聚乙二醇

http://www.xarxbio.com/pro/pro-811.html

DSPE-PEG-Mal 磷脂-聚乙二醇-马来酰胺

http://www.xarxbio.com/pro/pro-816.html

DSPE-PEG-DOX 磷脂-聚乙二醇-阿霉素

http://www.xarxbio.com/pro/pro-13103.html

DSPE-PEG-HSPC 磷脂-聚乙二醇-氢化大豆磷脂

http://www.xarxbio.com/pro/pro-38221.html

DSPE-PEG-DA7R 磷脂-聚乙二醇-DA7R肽

http://www.xarxbio.com/pro/pro-39023.html

DSPE-PEG-T7 磷脂-聚乙二醇-T7肽

http://www.xarxbio.com/pro/pro-14020.html

T7-LS T7修饰脂质体

http://www.xarxbio.com/pro/pro-39019.html

DA7R-LS DA7R修饰脂质体

http://www.xarxbio.com/pro/pro-39020.html

阿霉素修饰脂质体

http://www.xarxbio.com/pro/pro-5227.html

VCR修饰脂质体

http://www.xarxbio.com/pro/pro-39021.html

HSPC 氢化大豆磷脂酰胆碱

http://www.xarxbio.com/pro/pro-32416.html

Cholesterol 胆固醇

http://www.xarxbio.com/pro/pro-13767.html

DOX 阿霉素（科研用）

http://www.xarxbio.com/pro/pro-1393.html

DAPI染色剂

http://www.xarxbio.com/pro/pro-4993.html

本文涉及的合成技术

磷脂-PEG偶联技术

http://www.xarxbio.com/pro/progc-392-382.html

多肽定制技术

http://www.xarxbio.com/pro/progc-540-513.html

载药脂质体定制及其他脂质体定制技术

http://www.xarxbio.com/pro/progc-532-517.html

靶向肽修饰脂质体定制技术

http://www.xarxbio.com/pro/pro-39022.html 

原文献链接：https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/10717544.2017.1344334

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