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蛋白偶联多肽-载体蛋白修饰基团与Pfs48/45-158多肽偶联的制备及应用

时间:2022-02-17 17:38:43       浏览:441

多肽作为一种化合物,也是一类半抗原,缺乏一定的免疫原性,单独的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反应,而带抗原表位的载体蛋白有利于刺激辅助性细胞,进一步诱导细胞免疫反应。实验中经常利用多肽修饰基团与载体蛋白制备形成全抗原其中Pfs48/45抗原多载体蛋白偶联可以增加多肽的特异性

 

载体蛋白修饰马来酰亚胺基团

用过滤器将溶解载体蛋白(rEPA或BSA)的缓冲液转换乙二胺四乙酸EDTA,并调节蛋白浓度。Sulfo-EMCS粉末溶解,加入载体蛋白液中反应1h,迅速转换缓冲液至PBS-EDTA中,调节蛋白浓度测定载体蛋白上所加的马来酰亚胺基团数量。

 

Pfs48/45-158多肽制备:

马来酰亚胺修饰的载体蛋白滴定 Pfs48/45-158多肽,确定量和多肽的摩尔数。用PBS-EDTA配制多肽溶液,在7个反应管中加入等量的多肽溶液,除第1管外,在第2~7管中加入载体蛋白rEPA-M或BSA-M,加入量逐渐递增,在溶液上覆盖氮气后,22℃缓摇反应1h;加入试剂测定As值,检测反应后残余的Pfs48/45-158多肽。

 

载体蛋白偶联Pfs48/45-158多肽:

根据滴定终点时的体积比,在马来酰亚胺修饰的载体蛋白中加入过量的Pfs48/45-158多肽,覆盖氮气后,缓摇反应1h;对PBS溶液充分透析以去除未反应的Pfs48/45-158多肽。测定偶联后的载体蛋白浓度,用二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定偶联产物Pfs48/45-158-BSA

                                             

通过载体蛋白修饰马来酰亚胺基团Pfs48/45-158多肽偶联的制备,PIs48/45-158多肽与载体蛋白的分子特异性结合,使其生物活性增加PIs48/45-158多肽与载体蛋白偶联还形成全抗原对临床医学中的疾病起到一定控制免疫作用。这种方法简便易操作,可使多肽-蛋白偶联产物的质量和稳定性。

 

除此蛋白偶联外,瑞禧生物还可提供磷脂-PEG偶联多肽,PEG修饰多肽,共聚物修饰多肽,二氧化硅/上转换/量子点修饰多肽,多糖修饰多肽,药物偶联多肽,MOF修饰多肽。

 

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