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荧光标记多糖:壳聚糖/海藻酸钠多糖/小刺猴头菌多糖

时间:2022-03-11 17:46:20       浏览:490
多糖是由10个单糖分子缩合组成的一种高分子碳水化合物,是一类分子结构复杂且庞大的糖类物质。荧光可以标记(单糖,双糖,多糖,聚糖,琼脂糖,寡糖等) ,多糖由于结构比较复杂,分子量较多,在结构上就具有其他物质所不具备的加工特性和流变性质。荧光素类染料又包括异硫氰酸荧光素(FITC)、羟基荧光素(FAM)等。这些染料可以与-CHO、-SH、-NH2,等活性基团结合,用于荧光探针检测和分析多糖。况且本身缺乏发色基团和荧光基团,因此我们针对荧光标记多糖展开技术性的探究。
一.荧光标记壳聚糖

壳聚糖是多糖中的碱性多糖。壳聚糖分子结构中的氨基基团比甲壳素分子中的乙酰氨基基团反应活性更强,使得该多糖具有优异的生物学功能并能进行化学修饰反应。以荧光素异硫氰酸酯(FITC)作为标记化合物,采用紫外分光光度计在447nm下检测标记在壳聚糖上的FITC,通过m(FITC,μg)/m(壳聚糖,g)表征壳聚糖的荧光标记效率.考察壳聚糖溶液pH值、浓度、反应时间以及壳聚糖分子量、脱乙酰度对壳聚糖荧光标记反应的影响。


二.荧光标记海藻酸钠多糖

海洋生物多糖是从海洋、湖泊生物体内分离、纯化得到的多糖。比如壳多糖、海藻酸钠,螺旋藻多糖等。其中的荧光标记海藻酸钠,又名褐藻酸钠、海带胶、褐藻胶、藻酸盐,是由海带中提取的天然多糖碳水化合物,由于它特殊的结构和良好的生物相容性,具有科研所需的稳定性、溶解性、粘性。海藻酸钠已经逐渐作为化学改性的研究进展。



三.荧光标记小刺猴头菌多糖

菌类多糖包括:脂多糖,酵母多糖,猪苓多糖,小刺猴头菌多糖,黑木耳树舌多糖和树舌多糖等,小刺猴头菌多糖和黑木耳树舌多糖利用还原性的末端与氨基发生偶联反应。通过紫外分光光度计、酶标仪和荧光分光光度计对标记后的真菌多糖进行扫描,并进行运算,得到该2种菌多糖的荧光物质的取代度,分别为0.79%和0.71%。同时对标记后多糖的体外稳定性进行研究,结果表明,小刺猴头发酵浸膏多糖标记物和黑木耳发酵浸膏多糖标记物在PBS溶液、血浆及尿液中稳定性良好。

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