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L-DOX的制备及F-DOX/T-DOX的分离提取实验简述

时间:2023-11-01 11:27:31       浏览:192
L-DOX的制备:
L-DOX的脂质组成为HSPC/胆固醇/DSPE-PEG2000(11:8:1mol/mol)。阿霉素脂质体是通过远程加载制备的,它由跨膜硫酸铵梯度驱动。脂质体中DOX的浓度为2 mg/mL。采用Sephadex G50尺寸排除柱测定DOX脂质体的封装效率。采用UPLC-MS/MS系统分析DOX的浓度。DOX和内标(IS)(柔红霉素)检测为带电离子。


F-DOX和T-DOX的分离和提取:
采用Oasis HLB柱,采用SPE方法从E-DOX中分离血浆中的F-DOX。在没有真空的情况下,装载离子体样品。然后用水清洗HLB柱,然后用乙酸的甲醇洗脱,以洗脱吸附在HLB柱上的F-DOX。洗脱后的溶液用氮气干燥,残渣用初始流动相重悬。采用液-液萃取(LLE)提取血浆中的T-DOX硼酸盐缓冲液加入样品,用氯仿提取,然后浓缩。有机层用氮气干燥,用初始流动相重组。


F-DOX、T-DOX和IS的色谱图
(A)不添加DOX和IS的空白血浆样品;
(B)LLOQ样品;
(C)静脉注射后采集的真实血浆样本。
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