CY3-Cys-CPP-Cys，菁染料Cy3标记肌动蛋白-偶联-半脱氨基残基穿膜肽的化学反应原理
CY3-Cys-CPP-Cys是一种通过CY3荧光染料标记的功能化穿膜肽（Cell-Penetrating Peptide，CPP），两端通过半脱氨基残基（Cys）修饰，可与肌动蛋白或其他蛋白质偶联，实现靶向运输或细胞膜穿透实验。CY3提供激发约550 nm、发射约570 nm的可见光荧光信号，使穿膜肽在细胞内外过程可视化追踪，便于化学和生物学研究。
化学反应原理：
染料活化：
CY3通常以NHS酯或Maleimide形式活化，为肽的氨基或半脱氨基残基提供反应位点。
NHS酯可与Cys-CPP-Cys中的氨基形成稳定的酰胺键；Maleimide可与半脱氨基残基（硫醇）形成稳定的硫醚键，实现高选择性偶联。
肽结构与反应选择性：
Cys残基提供硫醇基，亲核性强，反应选择性高，优先与Maleimide染料结合。
半脱氨基处理降低了非特异性标记，保持肽活性和穿膜功能。
肽链其他赖氨酸或N端氨基可在特定条件下保留未被偶联，以避免结构破坏。
偶联机理：
酰胺化反应（CY3-NHS）：氨基孤对电子攻击CY3-NHS羧碳，形成四面体中间体，NHS离去，生成稳定的酰胺键。
巯基Michael加成（CY3-Maleimide）：Cys硫醇的孤对电子对Maleimide的双键进行亲核加成，形成稳定的硫醚键，偶联效率高，温和且选择性强。
反应条件：
pH 7.0–8.5，温和缓冲体系（如PBS或HEPES），避免高温和端pH破坏肽结构。
避光操作，防止CY3光漂白。
搅拌2–4小时或轻温孵育，充分完成偶联。
纯化与表征：
使用透析、凝胶过滤或RP-HPLC去除未反应染料。
质谱分析确认分子量增加，验证偶联成功。
荧光光谱测试荧光强度和稳定性，保证用于细胞成像和动力学研究。
应用优势：
高选择性偶联：Cys残基提供专一位点，避免肽功能受损。
可视化追踪：CY3信号便于实时观察穿膜肽的细胞摄取和分布。
化学稳定性：酰胺键或硫醚键稳定，适合体外和体内实验。
产品名称：CY3-Cys-CPP-Cys
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

推荐产品：

CY5-Pinosylvin
CY5-赤松素
CY5-直链淀粉
CY5-Amylose
FITC-ADP
异硫氰酸荧光素-二磷酸腺苷
CY5-黄芪甲苷
CY5-Astragaloside

仅用于科研，不能用于人体。小编axc