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PBA-PEG-Biotin,苯硼酸-聚乙二醇-生物素,Biotin-PEG-PBA的制备

时间:2026-03-23 16:47:12       浏览:34

PBA-PEG-Biotin,中文名称为苯硼酸-聚乙二醇-生物素,常用英文别名为Benzene Boronic Acid-PEG-Biotin、Phenylboronic acid-PEG-Biotin,是一种功能化聚乙二醇衍生物,由苯硼酸(PBA)、聚乙二醇(PEG)链和生物素(Biotin)三部分组成,兼具分子识别、柔性连接和高亲和结合能力,主要用于化学生物学、糖类分析、纳米材料功能化等领域,不涉及临床治疗方向。该化合物的外观性状由PEG分子量决定,可呈现固体或液体状态,溶于水和部分有机溶液,生物相容性优良,抗蛋白吸附能力强。

其制备采用分步偶联的方式,第一步是PEG链的活化与纯化,选择二氨基或二羧基PEG作为核心骨架,根据实验需求选择0.4k、1k、5k等不同分子量的PEG,将PEG溶于无水DMSO中,加入NHS和DCC,室温搅拌反应2-3小时,活化PEG的末端羧基,反应完成后过滤去除DCU沉淀,通过透析去除未反应的NHS和DCC,真空干燥得到活化的PEG中间体。第二步是苯硼酸(PBA)的偶联,将活化的PEG中间体溶于PBS缓冲液(pH 7.4)中,加入过量的PBA-NHS酯,37℃恒温搅拌反应6-8小时,使PEG末端的氨基与PBA-NHS酯发生酰胺化反应,实现PBA与PEG的连接。

第三步是生物素的偶联,向反应液中加入生物素-NHS酯,继续在37℃避光搅拌反应4-6小时,使PEG另一端的活化基团与生物素的氨基发生共价偶联,形成稳定的酰胺键。反应结束后,通过超滤去除小分子副产物和未反应的起始物,再经HPLC纯化,收集目标组分,真空干燥后获得高纯度的PBA-PEG-Biotin。该化合物可通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)及紫外-可见光谱表征结构和纯度,储存于-20℃以下冰冻干燥环境,其PBA基团可与糖类分子形成可逆糖苷键,生物素可与链霉亲和素高亲和力结合,是分子探针开发的重要工具。


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