LNP‑RNA‑APWHLSSQYSRT，LNP负载APWHLSSQYSRT多肽编码RNA阳离子脂质体，是以阳离子可电离脂质为核心基质，将编码APWHLSSQYSRT功能多肽的RNA分子包裹于脂质组装体水相内腔的阳离子脂质纳米组装体系。阳离子脂质依靠质子化后的正电荷，通过静电相互作用结合带负电的RNA链，保护核酸分子免受环境中核酸酶的降解破坏，实现核酸分子的纳米尺度包裹，多用于核酸‑脂质组装界面相互作用、胞内核酸释放过程的基础机理探究。

该体系采用微流控混合工艺完成制备，阳离子可电离脂质、辅助磷脂、胆固醇、PEG化脂质溶于有机相，编码APWHLSSQYSRT多肽的RNA溶解于酸性水相，两相高速微流控对冲混合，依靠静电络合自发组装形成阳离子脂质体。微流控技术可以精准调控两相流速配比，实现粒径窄分布的纳米颗粒制备，降低颗粒多分散系数。制备结束后通过阴离子交换纯化去除未络合的游离RNA，琼脂糖凝胶阻滞电泳验证RNA结合封装效果，动态光散射检测粒径与Zeta电位，琼脂糖凝胶酶解实验验证载体对核酸的酶解防护能力。颗粒粒径一般控制在70‑140nm，酸性环境下脂质充分质子化，呈现明显正电特征。

pH环境对整套体系组装与解离行为起到决定性作用。酸性条件有利于阳离子脂质质子化，强化脂质与RNA之间静电结合，维持颗粒完整结构；当环境pH升高至中性条件，脂质质子化程度下降，脂质‑核酸静电络合作用减弱，会逐步触发纳米颗粒解离，释放内部封装的RNA分子。缓冲液内高浓度阴离子盐离子会竞争中和阳离子脂质表面电荷，诱导颗粒解体与核酸泄露。

该体系主要用于核酸脂质组装基础研究，探究阳离子脂质结构、脂质核酸投料比对RNA络合封装效率的影响，研究脂质体在不同pH环境下的解离动力学。APWHLSSQYSRT为目标多肽编码序列，核酸被递送进入细胞之后，胞内翻译系统可以合成对应多肽，以此作为报告模型，用来评价不同阳离子脂质配方对于胞内核酸释放、翻译效率的影响，对比不同脂质组分对核酸保护能力的差异，为多肽编码核酸类脂质纳米载体的配方筛选提供标准化体外模型，可更换不同阳离子脂质骨架，系统性评价脂质化学结构对核酸组装性能的影响。

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